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伊势久生物 植物蔗糖酶检测试剂盒(分光光度法 50T/24S)微量法100T/48S 科研专用

价格 550/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/24S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂植物蔗糖酶检测试剂盒(分光光度法 50T/24S)
名称 生化试剂植物蔗糖酶检测试剂盒(分光光度法 50T/24S) 货号 SC009
包装类型 测定原理 本试剂盒采用3.5-二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

植物蔗糖酶(sucrase)试剂盒说明书

分光光度法 50/24

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的关键酶之一,能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。

测定原理:

本试剂盒采用3.5-二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5-二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。

组成:

产品名称

SC009-50T/24S

Storage

提取液:液体

60ml

4℃

试剂一:液体

2.5ml

4℃

试剂二:粉剂

1

4℃

试剂三:液体

5ml

常温

、说明书

一份

试剂二:粉剂×1支 ,4℃保存,用时加入1.5ml蒸馏水充分溶解;用不完的试剂4℃保存;

自备仪器和用品:

可见分光光度计、沸水浴、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

样品测定的准备:

按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

加样表测定步骤:

试剂名称(μl

对照管

测定管

试剂一

50

50

蒸馏水

50

样本

100

100

试剂二

50

置于25℃准确水浴10min

试剂三

100

100

混匀, 95℃水浴5min左右(盖紧,防止水分散失),冷却至室温

蒸馏水

700

700

混匀,520nm蒸馏水调零,测定各管吸光值,ΔA=A测定-A对照,每个测定管设一个对照管。

蔗糖酶活力计算:

1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.1296x -0.12x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

2、按照蛋白浓度计算

单位定义:每mg组织蛋白每分钟催化水解1μg蔗糖定义为一个酶活力单位。

蔗糖酶活力(μg/min/mg prot)=[1000×(ΔA 0.12)÷0.1296×V1]÷(V1×Cpr)÷T=771×(ΔA0.12)÷Cpr

3、按样本鲜重计算

单位定义:每g组织每分钟催化水解1μg蔗糖定义为一个酶活力单位。

蔗糖酶活力(μg/min/g鲜重)=[1000×(ΔA 0.12)÷0.1296×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=771×(ΔA0.12) ÷W

10001mg/ml=1000μg/mlV1:加入反应体系中样本体积,0.1mlV2:加入提取液体积,1mlT:反应时间,10minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本鲜重,g

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