伊势久生物 植物蔗糖酶检测试剂盒(分光光度法 50T/24S)微量法100T/48S 科研专用
价格 | ¥550/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品: 实验试剂,
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纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂植物蔗糖酶检测试剂盒(分光光度法 50T/24S) |
名称 | 生化试剂植物蔗糖酶检测试剂盒(分光光度法 50T/24S) | 货号 | SC009 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | 本试剂盒采用3.5-二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
植物蔗糖酶(sucrase)试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
蔗糖酶(EC 3.2.1.26)是碳水化合物消化吸收的关键酶之一,能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收。
测定原理:
本试剂盒采用3.5-二硝基水杨酸法测定蔗糖酶催化产生的还原糖的含量,由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5-二硝基水杨酸与还原糖共热被还原成棕红色的氨基化合物,在一定范围内还原糖的量和反应液的颜色深度成正比。此法操作简便、迅速、杂质干扰较小。
组成:
产品名称 |
SC009-50T/24S |
Storage |
提取液:液体 |
60ml |
4℃ |
试剂一:液体 |
2.5ml |
4℃ |
试剂二:粉剂 |
1支 |
4℃ |
试剂三:液体 |
5ml |
常温 |
、说明书 |
一份 |
试剂二:粉剂×1支 ,4℃保存,用时加入1.5ml蒸馏水充分溶解;用不完的试剂4℃保存;
自备仪器和用品:
可见分光光度计、沸水浴、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品测定的准备:
按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
加样表测定步骤:
试剂名称(μl) |
对照管 |
测定管 |
试剂一 |
50 |
50 |
蒸馏水 |
50 |
|
样本 |
100 |
100 |
试剂二 |
50 |
置于25℃准确水浴10min
试剂三 |
100 |
100 |
混匀, 95℃水浴5min左右(盖紧,防止水分散失),冷却至室温
蒸馏水 |
700 |
700 |
混匀,520nm蒸馏水调零,测定各管吸光值,ΔA=A测定-A对照,每个测定管设一个对照管。
蔗糖酶活力计算:
1、标准条件下测定的回归方程为y = 0.1296x -0.12;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。
2、按照蛋白浓度计算
单位定义:每mg组织蛋白每分钟催化水解1μg蔗糖定义为一个酶活力单位。
蔗糖酶活力(μg/min/mg prot)=[1000×(ΔA 0.12)÷0.1296×V1]÷(V1×Cpr)÷T=771×(ΔA0.12)÷Cpr。
3、按样本鲜重计算
单位定义:每g组织每分钟催化水解1μg蔗糖定义为一个酶活力单位。
蔗糖酶活力(μg/min/g鲜重)=[1000×(ΔA 0.12)÷0.1296×V1]÷(W×V1÷V2)÷T=771×(ΔA0.12) ÷W。
1000:1mg/ml=1000μg/ml;V1:加入反应体系中样本体积,0.1ml;V2:加入提取液体积,1ml;T:反应时间,10min; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本鲜重,g。
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