伊势久生物 中性转化酶（NI）检测试剂盒（分光光度法50T/24S）微量法100T/48S 科研专用
| 价格 | ￥550/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂中性转化酶（NI）检测试剂盒（分光光度法50T/24S） |
| 名称 | 生化试剂中性转化酶（NI）检测试剂盒（分光光度法50T/24S） | 货号 | SC013 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | NI催化蔗糖分解产生还原糖，进一步与3，5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
中性转化酶（Neutral invertase, NI）试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
蔗糖转化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据最适 pH，将高等植物Ivr分为酸性转化酶（AI）和中性转化酶（NI）两种类型。
NI主要存在于细胞质中，负责分解细胞质中蔗糖为果糖和葡萄糖。
测定原理：
NI催化蔗糖分解产生还原糖，进一步与3,5－二硝基水杨酸反应，生成棕红色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范围内510nm光吸收值与还原糖生成量成正比。通过光吸收增加速率来计算NI活性
组成：
产品名称 |
SC013-50T/24S |
Storage |
提取液：液体 |
50ml |
4℃ |
试剂一：液体 |
50ml |
4℃ |
试剂二：粉剂 |
1瓶 |
4℃ |
试剂三：液体 |
30ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
|
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入25ml试剂一充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存；
自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取：
按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤和加样表：
试剂名称（μl） |
测定管 |
对照管 |
样本 |
200 |
200 |
试剂一 |
800 |
|
试剂二 |
800 |
混匀， 37℃准确水浴30min后，95℃水浴10min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀（以保证浓度不变）
试剂三 |
500 |
500 |
混匀，95℃水浴10min（盖紧，以防止水分散失），流水冷却后充分混匀， 510nm处蒸馏水 调零，记录各管吸光值A，如果吸光值大于2，可以用蒸馏水稀释后测定（计算公式中乘以相应稀释倍数），ΔA=A测定-A对照。
NI活性计算：
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.001；x为标准品浓度（μg/ml），y为吸光值。
（1）按蛋白浓度计算：
单位的定义：37℃每mg蛋白每分钟产生1μg还原糖定义为一个酶活性单位。
NI活性（μg/min/mg prot）＝[(ΔA 0.001) ÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr ) ÷T=20.8×(ΔA 0.001) ÷Cpr
（2）按鲜重计算：
单位的定义：37℃每g组织每分钟产生1μg还原糖定义为一个酶活性单位。
NI活性（μg/min/g 鲜重）＝[(ΔA 0.001) ÷0.0016×V1]÷(W×V1÷V2) ÷T=20.8×(ΔA 0.001) ÷W
V1：加入反应体系中样本体积，0.2ml；V2：加入提取液体积，1ml；T：反应时间，30min； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本鲜重，g。
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