生化试剂土壤过氧化氢酶检测试剂盒(微量法100T/48S)
价格 | ¥850.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | SSQ004-100T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂土壤过氧化氢酶检测试剂盒(微量法100T/48S) |
名称 | 生化试剂土壤过氧化氢酶检测试剂盒(微量法100T/48S) |
土壤过氧化氢酶(Solid-Catalase,S-CAT)试剂盒说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-CAT是土壤微生物代谢的重要酶类,在H2O2清除系统中具有重要作用。
测定原理:
H2O2在240nm下有特征吸收峰,通过测定与土壤反应后溶液在此波长下吸光度的变化,即可反应S-CAT活性的高低。
试剂组成和配制:
产品名称
|
SSQ004-100T/48S
|
Storage
|
试剂一:液体
|
300μl
|
4℃
|
试剂二:粉剂
|
1瓶
|
4℃
|
试剂三:液体
|
3ml
|
4℃
|
说明书
|
一份
|
试剂一:液体300μl×1瓶,4℃保存;临用前加入29.7ml蒸馏水充分溶解后待用;用不完的试剂4℃保存;
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入1ml蒸馏水充分溶解待用,用不完的试剂4℃保存(如出现结晶析出,60℃-90℃水浴溶解后使用)。
自备仪器和用品:
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板(UV板)和蒸馏水。
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至240nm,蒸馏水调零。
2、测定前务必准备96孔UV板一块(UV板不是普通酶标板,普通酶标板只能透过可见光,不能透过紫外光,检测波长小于340nm务必使用UV板)。
3、加样表。
试剂名称
|
测定管
|
无基质管
|
风干土样(g)
|
0.03
|
0.03
|
试剂一(μl)
|
260
|
|
蒸馏水(μl)
|
|
260
|
25℃振荡培养 20min
|
||
试剂二(μl)
|
10
|
10
|
混匀8000g,25℃离心5min,取180uL上清
|
||
试剂三(μl)
|
20
|
20
|
混匀, 240nm处记录各管吸光值A。
|
注意事项
每个测定管要设一个无基质管,无土管只要做一管。
S-CAT活性计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
单位的定义:每天每g风干土样催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CAT(μmol/d/g)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷(ε×d)×106]÷W÷T=16.5×(A无土管-A测定管+A无基质管)
V反总:反应体系总体积,3×10-4L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm; T:反应时间,20 min=1/72d; W:样本质量,0.03g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
单位的定义:每天每g风干土样催化1μmol H2O2降解定义为一个酶活力单位。
计算公式:S-CAT(μmol/d/g)=[(A无土管-A测定管+A无基质管)×V反总÷(ε×d)×106]÷W÷T=33×(A无土管-A测定管+A无基质管)
V反总:反应体系总体积,3×10-4L;ε:过氧化氢摩尔消光系数,4.36×104L / mol /cm;d:96孔板光径,0.5cm; T:反应时间,20 min=1/72d; W:样品质量,0.03g。
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