生化试剂土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)检测试剂盒(微量法100T/48S)
价格 | ¥1120.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | SSQ008-100T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)检测试剂盒(微量法100T/48S) |
名称 | 生化试剂土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)检测试剂盒(微量法100T/48S) |
土壤β-葡萄糖苷酶(Solid-β-Glucosidase,S-β-GC)试剂盒说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
S-β-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖,是纤维素分解酶系中重要组成成分之一,在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
测定原理:
S-β-GC能够催化对-硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚,后者在400nm有特征光吸收。
试剂组成和配制:
产品名称
|
SSQ008-100T/48S
|
Storage
|
试剂一:甲苯
|
5ml(自备)
|
4℃
|
试剂二:粉剂
|
1瓶
|
-20℃
|
试剂三:液体
|
20ml
|
4℃
|
试剂四:液体
|
15ml
|
4℃
|
说明书
|
一份
|
试剂二:粉剂×1瓶,-20℃保存;临用前加入10ml蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂仍-20℃保存。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
样品处理:
新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至400nm,蒸馏水调零。
2、加样表。
试剂名称
|
测定管
|
对照管
|
风干土样(g)
|
0.02
|
0.02
|
试剂一(μl)
|
10
|
10
|
|
室温振荡混匀15min
|
90℃振荡混匀15min
|
试剂二(μl)
|
130
|
|
蒸馏水
|
|
130
|
试剂三(μl)
|
160
|
160
|
混匀, 37℃振荡反应1h后,90℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,
10000g 25℃离心10min,取上清液(在EP管或96孔板中加入下列试剂)
上清液(μl)
|
70
|
70
|
试剂四(μl)
|
130
|
130
|
充分混匀,室温静置2min后, 400nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
S-β-GC活力计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0032x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-β-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027)÷0.0032×V反总÷W÷T =112.5×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4L;W:样本质量,0.02g。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.0027;x为标准品浓度(μmol/L),y为吸光值。
单位的定义:每天每g土样中产生1 μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-β-GC活力(μmol/d/g 土样)= (ΔA+0.0027)÷0.0016×V反总÷W÷T =225×(ΔA+0.0027)
T:反应时间,1h=1/24d; V反总:反应体系总体积:3×10-4L;W:样本质量,0.02g。
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