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生化试剂土壤酸性转化酶(S-AI)检测试剂盒(微量法 100T/48S)

价格 1050.00/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 SSQ024-100T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂土壤酸性转化酶(S-AI)检测试剂盒(微量法 100T/48S)
名称 生化试剂土壤酸性转化酶(S-AI)检测试剂盒(微量法 100T/48S)


土壤酸性转化酶(Solid-Acid invertase, S-AI)试剂盒说明书

微量法 100/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-AIpH 4.5~5.0(酸性)条件下催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是土壤微生物蔗糖代谢关键酶之一。

测定原理:

S-AI催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与AI活性成正比。

试剂组成和配制:

产品名称

SSQ024-100T/48S

Storage

试剂一:液体

50ml

4℃

试剂二:粉剂

1

4℃

试剂三:液体

10ml

4℃

说明书

一份

试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入25ml试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存。

自备仪器和用品:

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。

样品处理:

新鲜土样自然风干或37度烘箱风干,过30~50目筛。

测定步骤和加样表:

试剂名称(μl

测定管

对照管

风干土样(g

0.05

0.05

试剂一

400

试剂二

400

混匀, 37℃准确水浴30min后,95℃水浴10min(盖紧,以防水分散失),流水冷却后

充分混匀(以保证浓度不变),10000g 25℃离心10min,取上清液;

上清液

200

200

试剂三

100

100

混匀,95℃水浴10min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀, 510nm处,记录各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数)ΔA=A测定-A对照。

S-AI活性计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.001x为标准品浓度(μg/ml),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1mg还原糖定义为一个S-AI活力单位。

S-AI活力(mg/d /g土样)=[(ΔA +0.001) ÷0.0016×V反总÷W÷T ÷1000=240×(ΔA+0.001)

V反总:反应体系总体积:0.4mlT:反应时间,1/48dW:样本质量,0.05g1mg=1000μg

b.96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定的回归方程为y = 0.0008x -0.001x为标准品浓度(μg/ml),y为吸光值。

单位的定义:每天每g土样中产生1mg还原糖定义为一个S-AI活力单位。

S-AI活力(mg/d/g土样)=[(ΔA +0.001) ÷0.0008×V反总÷W÷T ÷1000=480×(ΔA+0.001)

V反总:反应体系总体积:0.4mlT:反应时间,1/48dW:样本质量,0.05g1mg=1000μg

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