生化试剂土壤外切-β-1 4-葡聚糖酶(S-C1)检测试剂盒(微量法100T/48S)
价格 | ¥1250.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | SSQ035-100T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂土壤外切-β-1 4-葡聚糖酶(S-C1)检测试剂盒(微量法100T/48S) |
名称 | 生化试剂土壤外切-β-1 4-葡聚糖酶(S-C1)检测试剂盒(微量法100T/48S) |
土壤外切-β-1,4-葡聚糖酶/纤维二糖苷酶(S-C1)活性测定
试剂盒说明书
微量法 100管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
C1(EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。
测定原理:
采用3,5-二硝基水杨酸法测定S-C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。
试剂的组成和配制:
产品名称
|
SSQ035-100T/48S
|
Storage
|
提取液:液体
|
100ml
|
4℃
|
试剂一:液体
|
6ml
|
4℃
|
试剂二:液体
|
25ml
|
4℃
|
说明书
|
一份
|
自备仪器和用品:
酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
样品测定的准备:
称取约0.1g新鲜土样或风干土样,加入1ml提取液,进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。
2、加样表(在EP管中依次加入下列试剂)
试剂名称(μl)
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测定管
|
对照管
|
样本
|
10
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10
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试剂一
|
100
|
|
蒸馏水
|
|
100
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混匀,37℃准确水浴2h
试剂二
|
200
|
200
|
混匀, 90℃水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,取200μl至微量石英比色皿或96孔板中,测540nm下吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。
S-C1活性计算:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y = 6.4078x - 0.0673;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。
单位的定义:每g土样每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W
1000:1mg/ml=1000ug/ml;V反总:反应体系总体积,0.11ml; V样:加入样本体积,0.01 ml;V样总:加入提取液体积,1 ml;T:反应时间,120 min; W:样本质量,g;
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y = 3.2039x - 0.0673;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。
单位的定义:每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。
S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反总]÷(W× V样÷V样总) ÷T
=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W
1000:1mg/ml=1000ug/ml;V反总:反应体系总体积,0.11ml; V样:加入样本体积,0.01 ml;V样总:加入提取液体积,1 ml;T:反应时间,120 min; W:样本质量,g。
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