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生化试剂土壤外切-β-1 4-葡聚糖酶(S-C1)检测试剂盒(微量法100T/48S)

价格 1250.00/盒
起订量 ≥1
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基本参数

纯度 / 规格 SSQ035-100T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂土壤外切-β-1 4-葡聚糖酶(S-C1)检测试剂盒(微量法100T/48S)
名称 生化试剂土壤外切-β-1 4-葡聚糖酶(S-C1)检测试剂盒(微量法100T/48S)


土壤外切-β-14-葡聚糖酶/纤维二糖苷酶(S-C1)活性测定

试剂盒说明书

微量法 100/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

C1EC3.2.1.91)存在于细菌、真菌和动物体内,是纤维素酶系的组份之一,C1催化多聚糖链的末端非还原端释放出纤维二糖和葡萄糖。

测定原理:

采用3,5-二硝基水杨酸法测定S-C1催化微晶纤维素降解产生的还原糖的含量。

试剂的组成和配制:

产品名称

SSQ035-100T/48S

Storage

提取液:液体

100ml

4℃

试剂一:液体

6ml

4℃

试剂二:液体

25ml

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、离心机、可调式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水

样品测定的准备:

称取约0.1g新鲜土样或风干土样,加入1ml提取液,进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至540nm,蒸馏水调零。

2、加样表(在EP管中依次加入下列试剂)

试剂名称(μl

测定管

对照管

样本

10

10

试剂一

100

蒸馏水

100

混匀,37℃准确水浴2h

试剂二

200

200

混匀, 90℃水浴10min(盖紧,防止水分散失),冷却后,取200μl至微量石英比色皿或96孔板中,测540nm下吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。

S-C1活性计算

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y = 6.4078x - 0.0673x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

单位的定义:每g土样每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷6.4078×V反总]÷(W× V÷V样总) ÷T

=14.305×(ΔA+0.0673) ÷W

10001mg/ml=1000ug/mlV反总:反应体系总体积,0.11mlV样:加入样本体积,0.01 mlV样总:加入提取液体积,1 mlT:反应时间,120 minW:样本质量,g

b.96孔板测定的计算公式如下

标准条件下测定回归方程为y = 3.2039x - 0.0673x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。

单位的定义:每g组织每分钟催化产生1μg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-C1活力(μg /min /g鲜重)=[1000×(ΔA+0.0673) ÷3.2039×V反总]÷(W× V÷V样总) ÷T

=28.61×(ΔA+0.0673) ÷W

10001mg/ml=1000ug/mlV反总:反应体系总体积,0.11mlV样:加入样本体积,0.01 mlV样总:加入提取液体积,1 mlT:反应时间,120 minW:样本质量,g

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