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伊势久生物 土壤脂肪酶(S-LPS)检测试剂盒(分光光度法50T/48S)微量法100T/96S

价格 450/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂土壤脂肪酶(S-LPS)检测试剂盒(分光光度法50T/48S)
名称 生化试剂土壤脂肪酶(S-LPS)检测试剂盒(分光光度法50T/48S) 货号 SSQ036
包装类型 测定原理 LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

土壤脂肪酶(Solid-LipaseS-LPS)活性试剂盒说明书

分光光度法 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

LPS又称甘油酯水解酶,催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油(或者甘油二酯和单酯)。LPS广泛的存在于各种生物中。血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

测定原理:

LPS催化油酯水解成脂肪酸,利用铜皂法测定脂肪酸生成速率,即可计算LPS活性。

试剂组成和配制:

产品名称

SSQ036-50T/48S

Storage

试剂一:液体

90ml

4℃

试剂二:粉剂

14ml

4℃

试剂三:甲苯

100ml(自备)

4℃

试剂:粉剂

20ml

4℃

标准品:液体

10μl

4℃

说明书

一份

试剂二:液体14ml×1瓶,4℃保存。每次使用前用震荡混匀器剧烈震荡20min;

标准品:液体10μl×1瓶,10 μmol/ml的标准溶液,4℃保存。临用前加入3.168 ml甲苯,充分溶解。

自备仪器和用品:

研钵、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯100ml、冰和蒸馏水

样本处理:

建议称取约0.1g土样,加入1ml试剂一进行冰浴匀浆,再用回旋式振荡器振荡提取15min4℃4000g离心10min,取上清待测。

S-LPS测定操作:

1、分光光度计预热30 min以上,调节波长到710 nm,蒸馏水调零。

2、试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。

3、在5ml EP管中依次加入下列试剂

试剂名称(μl

空白管

测定管

蒸馏水

375

样本

125

试剂一

750

750

试剂二

250

37℃振荡反应10 min

试剂三

2000

2000

37℃振荡反应10 min后,8000g25℃,离心10min,取上清液

试剂名称(μl

空白管

测定管

标准管

上清液

1200

1200

标准品

1200

试剂四

300

300

300

37℃振荡反应5 min后,静置5min,取800μl上层液加入1 ml玻璃比色皿,于710nm处测定吸光值。

注意事项:

空白管和标准管只需测定一次。

S-LPS活性计算公式

活性单位定义:37℃中每克土样每分钟水解橄榄油生成1μmol脂肪酸为一个酶活单位。

S-LPS (μmol/min/g 土样) = [C标准品×(A测定管-A空白管A标准管- A空白管)]×V反总÷W×V÷V样总)÷T

=16×[(A测定管-A空白管A标准管- A空白管)]÷W

C标准品:10 μmol/mlV反总:反应总体积,2mlV样:反应中加入样本体积,0.125mlV样总:加入提取液体积,1mlW:样本质量,gT:催化反应时间,10 min

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