伊势久生物 土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)检测试剂盒(分光光度 50T/48S)微量法 100T/96S 科研专用
价格 | ¥700/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品: 实验试剂,
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进入店铺基本参数
纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)检测试剂盒(分光光度 50T/48S) |
名称 | 生化试剂土壤谷氨酰胺酶(S-GLS)检测试剂盒(分光光度 50T/48S) | 货号 | SSQ038 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
土壤谷氨酰胺酶(solid-glutaminase, S- GLS) 活性测定试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GLS(EC 3.5.1.2)存在于高等动物和某些细菌以及植物根中,催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨,在氮素代谢中具有重要调控作用,尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
测定原理:
S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨,利用奈氏试剂检测氨增加的速率,即可计算其酶活性。
试剂组成和配制:
产品名称 |
SSQ038-50T/48S |
Storage |
试剂一:液体 |
8ml |
4℃ |
试剂二:液体 |
20ml |
4℃ |
试剂三:液体 |
30ml |
常温 |
试剂四:液体 |
10ml |
常温 |
试剂五:液体 |
6ml |
常温 |
试剂六:液体 |
6ml |
常温避光 |
说明书 |
一份 |
自备仪器和用品:
台式离心机、可见分光光度计、1ml玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵、甲苯、冰和双蒸水。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至420nm,蒸馏水调零。
2、样品测定(在EP管中加入下列试剂);
试剂名称(μl) |
测定管 |
对照管 |
样本 |
0.1 |
|
甲苯 |
25 |
25 |
振荡混匀,室温放置15min;
试剂一 |
100 |
100 |
试剂二 |
400 |
400 |
混匀,37℃水浴2 小时
试剂三 |
525 |
525 |
混匀,8000 g,25℃离心10 min;取上清液,依次加入下列试剂
上清液 |
650 |
650 |
试剂四 |
150 |
150 |
试剂五 |
100 |
100 |
试剂六 |
100 |
100 |
混匀,室温静置15min,420nm处读取测定管和对照管吸光值,
计算ΔA=A测定管-A对照管。对照管只要做一管。
注意事项:
试剂六如出现沉淀,静置后取上清使用。
酶活性计算:
标准条件下测定的回归方程为y = 3.8488x0.0057;x为标准品浓度(μmol/ml),y为吸光值A。
单位定义:每g土样每min催化谷氨酰胺生成1nmol 氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS(nmol/min/g 土样)=(ΔA-0.0057)÷3.8488×V反总÷W÷T×1000
=2.27×(ΔA -0.0057)÷W。
V反总:反应体系总体积:1.05ml;T:反应时间,2h=120min;W:样本质量,g; 1000,μmol到nmol换算系数。
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