生化试剂土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)测定试剂盒(微量法100T/48S)
价格 | ¥780.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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纯度 | / | 规格 | SSQ097-100T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)测定试剂盒(微量法100T/48S) |
名称 | 生化试剂土壤酸性木聚糖酶(S-ACX)测定试剂盒(微量法100T/48S) |
土壤酸性木聚糖酶(Soil Acidic Xylanase,S-ACX)测定
试剂盒说明书
微量法100T/48S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物产生,能催化水解木聚糖,也被称为戊聚糖酶或半纤维素酶,可分解酿造或饲料工业中的原料细胞壁以及β-葡聚糖,降低酿造中物料的粘度,促进有效物质的释放,以及降低饲料中的非淀粉多糖,促进营养物质的吸收利用,因而广泛的应用于酿造和饲料工业中,ACX一般分离自耐酸的真菌,细菌及部分霉菌。
测定原理:
ACX在酸性环境下能将木聚糖降解成还原性寡糖和单糖,进一步在沸水浴条件下与3,5-二硝基水杨酸发生显色反应,在540nm处有特征吸收峰,反应液颜色的深浅与酶解产生的还原糖量成正比,通过测定反应液在540nm吸光值增加速率,可计算ACX活力。
组成:
产品名称
|
SSQ097-100T/48S
|
Storage
|
缓冲液:液体
|
10ml
|
4℃
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试剂一:液体
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3ml
|
4℃避光
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试剂二:液体
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10ml
|
4℃避光
|
说明书
|
一份
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自备仪器和用品:
天平、常温离心机、震荡仪、恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板。
样品处理:
新鲜土样风干,过30-50目筛。
测定操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至540nm。
2、操作表
|
对照管
|
测定管
|
土样(g)
|
0.02
|
0.02
|
缓冲液(μl)
|
150
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100
|
试剂一(μl)
|
|
50
|
混匀,50℃震荡反应30min,立即90℃水浴10min,8000g,25℃离心10min,取上清100μl
|
||
试剂二(μl)
|
100
|
100
|
混匀,90℃水浴中显色5min,取180μl于微量石英比色皿/96孔板测定540nm处吸光值A,分别记为A对照管、A测定管,△A=A测定管-A对照管。
|
S-ACX计算公式:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 2.5554x - 0.002 ,R2= 0.9983
酶活定义:50℃,pH4.8条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-ACX活力(μmol/d/g土样)= (△A+0.002)÷ 2.5554 ×V反总×103÷ W÷T÷ 150
=18.78 ×(△A+0.002)÷ W
V反总:反应总体积,0.15ml;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 1.2777x - 0.002 ,R2= 0.9983
酶活定义:50℃,pH4.8条件下,每克土壤每天分解木聚糖产生1μmol 还原糖所需的酶量为一个酶活单位。
S-ACX活力(μmol/d/g土样)=(△A+0.002)÷1.2777×V反总×103÷ W÷T÷ 150
= 37.56 ×(△A+0.002)÷ W
V反总:反应总体积,0.15ml;T:反应时间,1/48d;1000:1mmol/L =103μmol/L;150:木糖分子量。
注意事项:
1. 震荡反应30min,使酶与底物充分接触。
2. 注意90℃水浴防止爆开,以免改变反应体系。
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