生化试剂土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)检测试剂盒(微量法100T/48S)
价格 | ¥1800.00/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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纯度 | / | 规格 | SSQ103-100T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)检测试剂盒(微量法100T/48S) |
名称 | 生化试剂土壤β-木糖苷酶(S-β-XYS)检测试剂盒(微量法100T/48S) |
土壤β-木糖苷酶(Solid-β- xylosidase, S-β-XYS)测定试剂盒说明书
微量法100T/48S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体,是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶,产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外,β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业,比传统的漂白法环保,具有广泛的应用价值。
测定原理:
S-β-XYS催化对硝基苯酚-β-D-木糖苷产生对硝基苯酚,对硝基苯酚在405nm处有特征吸收峰,测定405nm光吸收增加速率,可计算S-β-XYS活性。
组成:
产品名称
|
SSQ103-100T/48S
|
Storage
|
提取液:液体
|
100ml
|
4℃
|
试剂一:液体
|
1ml
|
4℃避光
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试剂二:液体
|
10ml
|
4℃
|
试剂三:液体
|
10ml
|
4℃
|
说明书
|
一份
|
自备仪器和用品:
天平、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
粗酶液提取:
约0.1g鲜土或风干土样,加入1ml提取液进行冰浴匀浆,室温振荡提取30min,然后10000g,4℃,离心10min,取上清待测。
测定操作表:
1、分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长至405nm。
2、操作表
|
对照管
|
测定管
|
样本(μl)
|
40
|
40
|
试剂一(μl)
|
|
10
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试剂二(μl)
|
80
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70
|
混匀,45℃水浴20min
|
||
试剂三(μl)
|
80
|
80
|
混匀,静置5min,405nm处测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照管。
|
β-木糖苷酶活性计算公式:
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y=13.226x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/ml),y为吸光值ΔA。
酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷13.226×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=16.33×(ΔA-0.0011)÷W
V样总:加入提取液体积,1ml; V反总:反应总体积,0.12ml;V样:反应中样品体积,0.04ml; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y=6.613x+0.0011,R2=0.9998;x为标准品浓度(μmol/ml),y为吸光值ΔA
酶活定义:每克土样每天催化产生1μmol对硝基苯酚的酶量为一个酶活单位。
β-木糖苷酶活性(μmol/d /g 土样)=(ΔA-0.0011) ÷6.613×V反总÷(V样÷V样总×W)÷T
=32.66×(ΔA-0.0011)÷W
V样总:加入提取液体积,1ml; V反总:反应总体积,0.12ml;V样:反应中样品体积,0.04ml; W:样品质量,g;T:反应时间,20min=1/72d;
ΔA控制在0.01-1范围内,若ΔA大于1,可适当减小样本量。
标准曲线线性范围为:0.01μmol/ml-0.5μmol/ml。
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