伊势久生物 木质素过氧化物酶（Lip）检测试剂盒(分光光度法50T/48S)微量法100T/9 科研专用6S
| 价格 | ￥530/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂木质素过氧化物酶（Lip）检测试剂盒(分光光度法50T/48S) |
| 名称 | 生化试剂木质素过氧化物酶（Lip）检测试剂盒(分光光度法50T/48S) | 货号 | OT032 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | 木质素过氧化物酶催化天青脱甲基，在651nm处测定吸光值减少。 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
木质素过氧化物酶（Lignin peroxidase，Lip）试剂盒说明书
分光光度法50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
木质素过氧化物酶（EC1.11.1.14）是一种含亚铁血红素的过氧化物酶，属于木质素降解酶系，在木质素生物降解、造纸工业、纺织工业、芳香化合物转化与降解及环境污染控制等方面具有较大的应用潜力。
测定原理：
木质素过氧化物酶催化天青脱甲基，在651nm处测定吸光值减少。
试剂组成和配制：
产品名称 |
OT032-50T/48S |
Storage |
试剂一：粉剂 |
1瓶 |
4℃ |
试剂二：液体 |
12ml |
4℃避光 |
试剂三：液体 |
12ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
|
试剂一：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入80ml蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存1个月；
需自备仪器和用品：
天平、研钵、低温离心机、分光光度计、1 ml玻璃比色皿、可调式移液器、冰。
酶液提取：
1、组织：按照质量（g）：试剂一体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1ml试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
2、细胞：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
3、培养液或其它液体：直接检测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至651nm，蒸馏水调零。
2、临用前按每个样本试剂一：试剂二：试剂三= 400:200:200（μl）的比例配制工作液，现配现用。
3、在1ml玻璃比色皿中依次加入如下试剂
测定管 |
|
样品（μl） |
200 |
工作液（μl） |
800 |
充分混匀，立即测定651nm处10s和130s吸光值，记为A1和A2，△A=A1- A2
酶活计算公式：
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：每mg组织蛋白在每ml反应体系中每分钟A651变化0.02为一个酶活力单位。
LiP活性（U/mg prot）= ΔA×V反总÷（V样×Cpr）÷0.02÷T =125×ΔA÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：每g组织在每ml反应体系中每分钟A651变化0.02为一个酶活力单位。
LiP活性（U/g 鲜重）＝ΔA×V反总÷(W× V样÷V样总)÷0.02÷T =125×ΔA÷W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：每1万个细菌或细胞在每ml反应体系中每分钟A651变化0.02为一个酶活力单位。
LiP活性（U/104 cell）＝ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.02÷T =0.25×ΔA
4．按照液体体积计算
酶活性定义：每ml血清（浆）在每ml反应体系中每分钟A651变化0.02为一个酶活力单位。
LiP活性（U/ml）=ΔA×V反总÷V样÷0.02÷T =125×ΔA
V反总：反应总体积，1ml；V样：反应中样本体积，0.2ml；V样总：加入提取液体积，1ml；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；W：样本质量，g；T：反应时间，2min
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