伊势久生物 脂蛋白酯酶（LPL）检测试剂盒(分光光度法50T/24S)微量法100T/48S 科研专用
| 价格 | ￥430/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂脂蛋白酯酶（LPL）检测试剂盒(分光光度法50T/24S) |
| 名称 | 生化试剂脂蛋白酯酶（LPL）检测试剂盒(分光光度法50T/24S) | 货号 | FA033 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | 脂蛋白酯酶水解4-硝 基 苯棕榈酸酯产生4-硝基 苯酚，在400nm有特征吸收峰。 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
脂蛋白酯酶（Lipoprotein lipase，LPL）试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
脂蛋白酯酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞及巨噬细胞等实质细胞合成的一种酶，可催化甘油三脂水解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存，并在不同的组织表现出不同的生理意义。
测定原理：
脂蛋白酯酶水解4-硝基苯棕榈酸酯产生4-硝基苯酚，在400nm有特征吸收峰。
组成：
产品名称 |
FA033-50T/24S |
Storage |
试剂一：液体 |
60ml |
4℃ |
试剂二：液体 |
10ml |
4℃避光 |
试剂三：液体 |
25ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
|
自备仪器和用品：
天平、冷冻离心机、研钵、水浴锅、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿。
样品处理：
1.组织：按照质量（g）：试剂一体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1ml试剂一）加入试剂一，冰浴匀浆后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
2.细胞：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml试剂一）加入试剂一，冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后于4℃，10000g离心10min，取上清待测。
3.血清：直接测定。
测定操作：
对照管 |
测定管 |
|
样品（μl） |
100 |
100 |
试剂一（μl） |
400 |
|
试剂二（μl） |
400 |
|
混匀，45℃水浴10min |
||
试剂三（μl） |
500 |
500 |
充分混匀，25℃静置2min，于1ml玻璃比色皿，蒸馏水调零，测定400nm处吸光值，记为A对照管和A测定管，△A=A测定管-A对照管 |
||
计算公式：
标准曲线：y= 0.0581x -0.0169，R2=0.9982
1．按照蛋白浓度计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫克蛋白每分钟水解产生1μmol 4-硝基苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol/min/mg prot）= （△A 0.0169）÷ 0.0581×V反总÷（V样×Cpr）÷T
= 17.21×（△A 0.0169）÷Cpr
2．按照样本质量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每克组织每分钟水解产生1μmol 4-硝基苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol/min /g 鲜重）=（△A 0.0169）÷0.0581×V反总÷（W×V样÷V样总）÷T
= 17.21×（△A 0.0169）÷W
3．按照细胞数量计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每104个细胞每分钟水解产生1μmol 4-硝基苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol/min /104cell）= （△A 0.0169）÷0.0581×V反总÷（V样×细胞数量÷V样总）÷T
= 17.21×（△A 0.0169）÷细胞数量
4．按照液体体积计算
酶活性定义：在45℃，pH7.5条件下，每毫升血清每分钟水解产生1μmol 4-硝基苯酚为一个酶活力单位。
LPL活性（μmol/min /ml）=（△A 0.0169）÷0.0581×V反总÷V样÷T
= 17.21×（△A 0.0169）
V反总：反应总体积，1ml；V样：反应体系中加入样本体积，0.1ml；W：样本质量，g；V样总：加入提取液体积，1ml；T：反应时间，10min
注意事项：
1.试剂三加入混匀后静置两分钟立即测定，否则影响吸光值。
2.吸光值过高或者测定结果不稳定，则将酶液进行适当的稀释，并在计算公式中乘以稀释倍数。
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