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伊势久生物 果胶酯酶检测试剂盒 NaOH滴定法50T/48S 科研专用

价格 550/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂果胶酯酶检测试剂盒(NaOH滴定法50T/48S)
名称 生化试剂果胶酯酶检测试剂盒(NaOH滴定法50T/48S) 货号 PCS013
包装类型 测定原理 通过碱消耗的NaOH量反映果胶酯酶的活性
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

果胶酯酶(pectinesterasePE)试剂盒说明书

(NaOH滴定法) 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

果胶酯酶, 属果胶酶系,亦称为果胶酶、果胶甲酯酶、果胶氧化酶。催化水解果胶长链上的甲氧酯水解产生小分子物质果胶酸和甲醇, 从而增加果胶在水中的溶解度。广泛存在于高等植物和可以降解细胞壁的细菌和真菌中,起内源调控植物细胞壁上及细胞之间果胶含量的作用,在食品工业中具有及其重要的作用和开发前景。

测定原理:

果胶酯酶催化水解果胶分子释放H ,使反应体系的pH下降,用碱液维持体系的pH始终保持在7.8(酚酞指示剂维持在粉红色),通过碱消耗的NaOH量反映果胶酯酶的活性。

试剂的组成和配制:

产品名称

PCS013-50T/48S

Storage

提取液:粉剂

1

4℃

试剂一:粉剂

1

4℃

试剂二:液体

1

4℃

试剂三:液体

50ml

4℃

试剂:液体

--

--

说明书

一份

提取液:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前每瓶加双蒸水100ml充分溶解。

试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加少量蒸馏水溶解,然后转入500ml容量瓶,用蒸馏水定容至500ml

试剂二:液体×1瓶,4℃保存。易挥发,使用后及时用封口膜封口。

试剂四:用蒸馏水将试剂三稀释5倍,得试剂四。

需自备的仪器和用品:

天平、研钵、离心机、烘箱

样品处理:

称取1g组织样品,加入2ml提取液冰浴充分研磨(研钵提前-20℃预冷10min,提取液提前4℃预冷。可以根据客户自己的样本特殊性,自行按比例调整),12000g4℃离心15min,取全部上清液待测。

测定步骤:

1、试剂一于37℃烘箱保温10min,样本全部提取上清(约2ml)分别转移至15 ml离心管或者试管中。

2、向样本上清中分别加入50μl试剂二,混匀。然后每管加入8 ml试剂一混匀,并用试剂四调节pH7.8(粉红色)。

3、将上述各离心管或试管放置37℃烘箱60分钟。每隔20分钟用试剂四调节pH,使pH维持在7.8(粉红色)。记录所消耗的试剂四的体积Vml)。

计算公式

酶活定义:每g组织每分钟消耗1μmol NaOH定义为一个酶活单位U

PE活性(U/g= 20VF/(TW)= VF/(3W)

V:滴定所消耗的试剂四的量,mlT:反应时间,60 minF:样品稀释倍数;W:样品质量,g

注意事项

1、试剂一提前预热,酶反应速率。

2、实验前先做预实验,如果酶活力太高,适当调整样本稀释倍数,如将样品稀释2-5倍进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。

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