伊势久生物 果糖1,6-二磷酸醛缩酶 FDA 检测试剂盒 分光光度法50T/48S微量法100T/96S 科研专用
| 价格 | ￥1400/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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所在地区：上海 上海市
主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂果糖1，6-二磷酸醛缩酶（FDA）检测试剂盒(分光光度法50T/48S) |
| 名称 | 生化试剂果糖1，6-二磷酸醛缩酶（FDA）检测试剂盒(分光光度法50T/48S) | 货号 | PSS012 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | 340nm处吸光值的变化可反映果糖1，6-二磷酸醛缩酶活性的高低 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
果糖1,6-二磷酸醛缩酶（Fructose 1,6 bisphosphate aldolase，FDA）试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
植物叶绿体中果糖1,6-二磷酸醛缩酶是光合作用中参与calvin循环的重要酶。催化果糖1,6-二磷酸和景天庚酮糖1,7-二磷酸的合成反应，在各种逆境胁迫下表现不同的响应。
测定原理：
果糖1,6-二磷酸醛缩酶催化果糖1,6-二磷酸生成3-磷酸甘油醛和磷酸二羟丙酮，在磷酸丙糖异构酶和α-磷酸甘油脱氢酶作用下催化NADH和磷酸二羟丙酮生成NAD和α-磷酸甘油，340nm处吸光值的变化可反映果糖1,6-二磷酸醛缩酶活性的高低。
组成：
产品名称 |
PSS012-50T/48S |
Storage |
提取液一：液体 |
50ml |
4℃ |
提取液二：液体 |
50ml |
4℃ |
试剂一：液体 |
25ml |
4℃避光 |
试剂二：粉剂 |
1瓶 |
-20℃避光 |
试剂三：粉剂 |
1瓶 |
-20℃避光 |
试剂四：粉剂 |
1瓶 |
4℃避光 |
试剂五：液体 |
1瓶 |
4℃避光 |
说明书 |
一份 |
|
试剂二：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。临用前加5ml蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。临用前加5 ml蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。临用前加5 ml蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂五：液体×1瓶，4℃避光保存；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
自备仪器和用品：
天平、低温离心机、震荡仪、研钵、紫外分光光度计、1 ml石英比色皿。
酶液提取：
①总FDA酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1ml提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体FDA酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1ml提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆FDA酶活性，取沉淀加1ml提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中FDA酶活性。
建议测定总FDA酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FDA，则按照步骤②提取粗酶液。
测定操作：
1.分光光度计预热30min，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2.取1ml石英比色皿，依次加入500μl试剂一，100μl试剂二，100μl试剂三，100μl试剂四，100μl试剂五，100μl粗酶液，充分混匀，记录340nm处10s的吸光值A1和310s的吸光值A2，△A=A1-A2
计算公式：
（1）按照样本蛋白浓度计算
酶活单位定义：每毫克组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min /mg prot）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×Cpr) ÷T=321.54×ΔA÷Cpr
（2）按照样本质量计算
酶活单位定义：每克组织每分消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min /g 鲜重）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.54×ΔA÷W
（3）按照细胞数量计算
酶活单位定义：每104个细胞每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min /104cell）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷(V样×细胞数量÷V样总) ÷T
= 321.54×ΔA÷细胞数量
（4）按照液体体积计算
酶活单位定义：每毫升液体每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。
FDA（nmol/min /ml）= ΔA÷（ε×d）×V反总÷V样÷T=321.54×ΔA
V反总：反应体系总体积，1ml；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.1ml；V样总：加入提取液体积，1ml；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g
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