生化试剂H2S含量测定试剂盒 微量法100T/96S
| 价格 | ￥1200.00/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | SG002-100T/96S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂H2S含量测定试剂盒 微量法100T/96S |
| 名称 | 生化试剂H2S含量测定试剂盒 微量法100T/96S |
H2S含量测定试剂盒说明书
微量法 100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
H2S是一种新型气态信号分子，存在于脑内的神经递质，生理浓度的H2S对神经系统海马的长时程增强功能具有重要的调节作用，并对自发性高血压、出血性休克及肝硬化等疾病的过程发挥着重要的病理生理效应。
测定原理：
H2S与醋酸锌、N, N-二甲基对苯二胺和硫酸铁铵等反应生成亚甲基蓝，亚甲基蓝在665nm处有最大吸收峰，通过测定其吸光值可计算H2S含量。
组成：
产品名称
|
SG002-100T/96S
|
Storage
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提取液：液体
|
100ml
|
4℃
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试剂一：液体
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25ml
|
4℃
|
试剂二：液体
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16ml
|
4℃
|
试剂三：液体
|
8ml
|
4℃避光
|
试剂四：液体
|
8ml
|
4℃
|
试剂五：液体
|
1.5ml
|
4℃避光
|
说明书
|
一份
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自备仪器和用品：
天平、低温离心机、酶标仪、96孔板、蒸馏水。
样品处理：
1.组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
3.血清（浆）：直接测定。
操作表：
1、酶标仪预热30min，调节波长至665nm。
2、操作表
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空白管
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测定管
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样品（μl）
|
|
150
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H2O（μl）
|
150
|
|
试剂一（μl）
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150
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150
|
充分震荡混匀
|
||
试剂二（μl）
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150
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150
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10000g，4℃，离心10min，去上清，留沉淀
|
||
H2O（μl）
|
150
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150
|
10000g，4℃，离心10min，去上清，留沉淀
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||
试剂一（μl）
|
75
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75
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试剂三（μl）
|
75
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75
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充分震荡混匀
|
||
试剂四（μl）
|
75
|
75
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10000rpm，4℃，离心10min，吸取200μl上清于96孔板中
|
||
试剂五（μl）
|
10
|
10
|
混匀，25℃静置5min，测定665nm吸光值，记为A测定和A空白，ΔA=A测定-A空白。
|
||
H2S含量计算公式：
用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线回归方程为：y = 0.0022x，R2 = 0.9988
（1）组织样品
a.按照蛋白浓度计算
H2S（nmol/mg prot）=×V反总÷(V样×Cpr)=681.8×ΔA÷Cpr
b.按照样本重量计算
H2S（nmol/g 鲜重）=×V反总÷(V样÷V样总×W)= 681.8×ΔA÷W
(3) 细胞
H2S（nmol/104 cell）=×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量(万个)）=681.8×ΔA÷细胞数量（万个）
（2）液体样品H2S（nmol/ml）=×V反总÷V样= 681.8×ΔA
V反总：反应总体积，0.225ml；V样：反应中样品体积，0.15ml；V样总：加入提取液体积，1ml；W：样品质量，g；Cpr：蛋白浓度，mg/ml
注意事项:最低检出限为1nmol/ml。
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