伊势久生物 BCA法蛋白质含量测定试剂盒 分光光度法 50T/48S微量法100T/96S 科研专用
| 价格 | ￥120/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂BCA法蛋白质含量测定试剂盒 分光光度法 50T/48S |
| 名称 | 生化试剂BCA法蛋白质含量测定试剂盒 分光光度法 50T/48S | 货号 | PDM005 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | 碱性条件下，蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键，能将Cu2+还原成Cu+ |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
BCA法蛋白含量测定试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
测定原理：
碱性条件下，蛋白质中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽键，能将Cu2 还原成Cu ；2分子的BCA与Cu 结合，生成紫色络合物，在540-595nm有吸收峰，562nm处吸收峰最强。
自备仪器和用品：
台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计、移液器、1 ml玻璃比色皿和蒸馏水
组成：
产品名称 |
PMD005-50T/48S |
Storage |
试剂A：液体 |
60ml |
4℃ |
试剂B：液体 |
1.2ml |
4℃ |
标准蛋白：液体 |
2ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
|
工作液配制：临用前请根据拟用工作液体积（样本数×1 ml），将试剂A和B按照50：1的比例混合，盖紧后充分混匀。
样品中可溶性蛋白质提取：
1、液体样品：澄清无色液体样品可以直接测定。。
2、组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水）
冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即待测液。
3 、细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：细菌、细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。
测定步骤：
1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到562nm，蒸馏水调零。
2.工作液置于60℃水浴预热30 min。
空白管 |
标准管 |
测定管 |
|
蒸馏水（μl） |
20 |
||
标准品（μl） |
20 |
||
待测液（μl） |
20 |
||
工作液（μl） |
1000 |
1000 |
1000 |
混匀后置于60℃保温30min，于1ml比色皿在562nm处测定吸光值A，分别记为A空白管、A标准管、A测定。 |
|||
注意：空白管和标准管只需要做一次。
计算公式：
Cpr (mg/ml) = C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）
= 0.5×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）
Cpr (mg/g)= C标准品×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ W
= 0.5×（A测定管－A空白管）÷（A标准管－A空白管）÷ W
W: 样本质量，g
注意事项：
BCA法蛋白含量测定试剂盒，适用于测定蛋白浓度在20-5000μg/ml样品。测定前取1-2个样做预实验，若A测定管－A空白管﹥1.5，需将样本用提取液稀释后再测定，以确保测定的准确性。
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