伊势久生物 HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS,pH7.05) 100ml 科研专用
| 价格 | ￥156.00/瓶 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 100ml |
| 品牌 | 伊势久 | 用途范围 | 生化研究 |
| 包装类型 | 瓶 | 保质期 | —20℃，12个月 |
| 产品规格 | 100ml | 产品名称 | HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS，pH7.05) |
| 产品用途 | 生化研究 | 名称 | HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS，pH7.05) |
HEPES 缓冲盐溶液(2×HeBS,pH7.05)
简介：
HEPES 即 4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethanesulfonic acid，中文名称N-(2-羟乙基)哌嗪- N'-2 磺酸，分子式为 C8H18N2O4S，分子量为 238.31，HEPES 是一种非离子两性缓冲剂，能有效控制pH 在 6.8～8.2范围， 尤其在 pH7.2～7.4 具有较好的缓冲能力，终浓度一般为 10～50mmol/L，培养液内20mmol/LHEPES 即可达到较好的缓冲能力。
BIOSICOHEPES 缓冲盐溶液(2×HeBS,pH7.05)是常用的一种细胞转染试剂，亦可用于其他用途，经过无菌处理。HEPES 缓冲盐溶液用于转染时，其最适 pH7.05～7.12，在此范围内均可，如果有必要可以检测其转染效率。
组成：
产品名称
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CC043-100ml
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Storage
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HEPES缓冲盐溶液(2×HeBS,pH7.05)
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100ml
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-20℃
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说明书
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一份
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保存条件：
-20℃保存,12个月有效。
主要成分：
主要由HEPES、氯化钠、磷酸盐、去离子水等组成，经过滤除菌。
自备材料：
1、培养皿
2、培养液
3、病毒质粒 DNA
4、氯化钙溶液，亦可采购 BIOSICO的氯化钙溶液(2.5mol/L,无菌)。
操作步骤(仅供参考)：
1、以病毒转染 293 细胞为例，转染前24h，接种适量的293细胞接种于6cm 培养皿中，其接种密度应为 2.5×104细胞/ml。
2、转染时先吸除培养液，更换新鲜培养液，其细胞汇片应到 80%左右，并尽量避免细胞成团。
3、按 6～10μg 病毒质粒 DNA 溶解于无菌水，其终体积为 438μl，加入无菌的2mol/L氯化钙 62μl，合计500μl。
4、加入 2×HeBS(pH7.05) 500μl到上述含有 DNA 的 500μl溶液中，轻轻且充分混匀。加入到细胞中，轻轻转动培养皿使其混匀。
5、继续培养细胞，24h 时更换新鲜培养液，使细胞汇片接近 100% (一般需要 24h～48h)。
6、转染 48h 后，轻轻吸除细胞培养的黄色上清。
7、(可选)如有必要，4℃ 500g离心5min，弃沉淀，收集上清。
8、收集的病毒上清 4℃保存1～2h 后，-80℃保存。
9、37℃孵育后使用，进行下游实验。
注意事项：
1、注意无菌操作，尽量避免污染。
2、加入2×HeBS(pH7.05) 500μl到上述含有 DNA 的 500μl溶液后，应在 1～2min 内加入到细胞中，时间间隔不宜过久，以免影响转染效果。
3、转染12～24h后，可以加入终浓度为10mmol/L的丁酸钠溶液，可以提高病毒滴度。
4、收集病毒上清时，可以每隔12h收集一次，但同时应补足培养液。这种情况下，病毒滴度没有明显下降。
5、4℃ 500g 离心5min收集上清目的在于去除活细胞。
6、该试剂用于转染时，应检测其转染效率，好的转染效率应介于30～60%之间。
7、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
8、本产品仅由于科研，严禁他用。
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