GST融合蛋白纯化用琼脂糖磁珠GST标签蛋白纯化磁珠GSH磁珠pull down
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起订量 | ≥1 | |
所在地 | 江苏 苏州 | 可售量 10000瓶 |
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货号 | CAS号 | 编号 | 包装 | 参数 | 库存 | 补货期 | 价格 |
BK2021081044 | CAS | BK2021081044 | 100 | 0 |
GST融合蛋白纯化磁珠(Magarose-GSH)具有高效、快速、方便等特点,是公司针对纯化 GST 标签融合蛋白而研制的一种新型纯化介质,可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步获得高纯度的目标蛋白,极大地简化纯化工艺和提高纯化效率,适合科研和工业领域便捷地进行 GST 融合蛋白的纯化。使用Magarose-GSH磁珠进行 GST Pull-down 实验,操作简单、快捷,具有传统方法无可比拟的优势。
二、产品特性
三、使用方法
结合/洗杂液:140mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH 7.4;
1.1磁珠准备:将GST纯化磁珠充分混匀,使用移液器取4 ml的磁珠悬浮液(磁珠体积为1 ml)置于离心管中,将离心管置于磁分离器上,待溶液澄清后,用移弃清液,加入去离子水反复清洗去除酒精。
1.3磁珠与蛋白结合:将GST融合蛋白裂解液加入到处理好的磁珠中,颠倒混匀,室温孵育30 min(如果目标蛋白不稳定,建议置于2-8 ℃下孵育1 h)。
1.5洗脱:加入与悬浮液等体积的洗脱液,用移液器吹打5次,室温下孵育5-10 min,置于磁分离器上,待溶液澄清后,吸取上清液,即为目的蛋白组分。重复上述步骤多次,分别收集洗脱组分并留样检测,以提高目的蛋白的回收量。
注意:1. 谷胱甘肽现用现配。
3. 结合/洗杂液和洗脱液中可添加1~5mM EDTA、1~10mM DTT、0.1~1.0%Triton X-100、0.1~1.0%Tween 20等。
1.7 磁珠清洗和保存:磁珠使用后经过简单清洗处理后,可以继续用于后续的纯化操作,也可长时间保存。用户可根据磁珠使用情况选择清洗方法,主要有:
w 高pH洗(碱洗):使用后的磁珠加入10 mL 清洗液A(0.1 M Tris-HCl,0.5 M NaCl,pH 8.5),漩涡振荡60 s,磁性分离,去除上清液;
w 重复碱洗、酸洗交替清洗2次,共3次。
w 先用5 mL 6 M盐酸胍洗涤2次,每次漩涡振荡60 s,磁性分离,去除上清液;
w 先用5 mL 70%乙醇或0.1%的非离子型表面活性剂洗3次,每次漩涡60 s,磁分离,去除上清液;
结合/洗杂Buffer:140mM NaCl, 2.7mM KCl, 10mM Na2HPO4, 1.8mM KH2PO4, pH7.4
2) 磁珠平衡:从磁分离器上取下离心管,加入与悬浮液等体积的结合液,反复吹打5-10次,置离心管于磁分离器上,待溶液澄清后,吸弃清液,重复洗涤2次。
4) 磁珠洗杂:将离心管置于磁分离器,待溶液澄清后,移出上清液,保留以备取样检测。向离心管中加入2倍悬浮液体积的洗杂液,反复吹打5-10次,置离心管于磁分离器上,待溶液变澄清后,吸弃上清液,重复上述步骤2次,即得靶蛋白-磁珠复合物。
6) 磁珠洗杂:将离心管置于磁分离器,待溶液澄清后,移出上清液,保留以备取样检测。向离心管中加入2倍悬浮液体积的洗杂液,反复吹打5-10次,将离心管置于磁分离器上,待溶液变澄清后,吸弃上清液。重复上述步骤2次。目标蛋白通过与靶蛋白的结合,从混合体系中被捕获。
1) 磁珠使用和保存过程中应避免冷冻、干燥和高速离心等操作;
3) 磁珠与溶液混合过程中,如果溶液粘稠无法通过翻转离心管重悬磁珠,可采用移液器反复吹吸或短时漩涡混合使磁珠充分重悬;
5) 本产品可重复使用,重复使用时,建议纯化同种蛋白,纯化不同种类的蛋白时,建议使用新的磁珠,以防交叉污染;
本试剂盒只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果概不承担责任。
温馨提示:苏州北科震泽供应产品仅用于科研,不能用于人体,部分网站示意图源自互联网,图片仅供参考,请以实际测试结果为准,如有侵权请联系我们立即删除。 |
苏州凯发新材料科技有限公司
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