伊势久生物 碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法) 3×50ml 3×100ml 科研专用
价格 | ¥507.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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纯度 | / | 规格 | 3×50ml |
品牌 | 伊势久 | 用途范围 | 生化研究 |
包装类型 | 瓶 | 保质期 | 4℃,避光,6个月 |
产品规格 | 3×50ml | 产品名称 | 碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法) |
产品用途 | 生化研究 | 名称 | 碱性磷酸酶染色液(改良Gomori钙钴法) |
碱性磷酸酶染色液(改良 Gomor i 钙钻法)
简介:
碱性磷 酸酶 (a l ka l i ne phos phata se, 简称 ALP 或 AKP) 为一类磷酸醋殿,广泛分布二J 哺 乳 动物组织内 ,其活性所衙最适pH 9 . 2~9 . 8。此胎主要存在于物质交换活跃之处(细胞朕),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆智膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮。此酶还见内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞朕及吞饮小泡。
现用金屈沉淀法来显示碱性磷酸酶活性。此法以天然存在的 β- 甘油磷酸钠为底物 ,经酶水解释放出磷酸,立即被钙离子沉淀为磷酸钙,再依次被 置换为磷酸钻和硫化钻,最终产物为黑色硫化钻沉淀。
组成:
产品名称
|
SE008-3×50ml
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SE008-3×100ml
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Storage
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试剂(A) :ALP 孵育液
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50ml
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100ml
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4℃,避光
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试剂 (B) :硝酸钻溶液
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50ml
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100ml
|
RT 避光
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试剂 (C) :ALP硫化液
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2×1ml
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3 ×1 ml
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RT 避光
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试剂(D):ALP对照液
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10ml
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20 ml
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4℃,避光
|
说明书
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一份
|
保存条件:
4℃,避光保存,6个月有效
自备材料:
蒸馏水、温箱或水浴锅
操作步骤(仅供参考):
(一) 石蜡切片染色
1、石蜡切片脱 蜡至蒸馈水。
2、切片入 ALP孵育液,置于37℃孵育2 - 1 2 h。
3、流水洗2mi n ,入蒸饰水。
4、入硝酸钻溶液中,37℃孵育5 min。
5、流水冲洗5min ,蒸馏水洗。
6、在上述过程中配制 ALP 硫化工作液, 即取试剂 ( C) 用蒸饰水稀释50 倍,即为 ALP 硫化工作液, 即配即用。切片入硫化工作液,孵育 2min。
7、流水洗 l0mi n,入蒸馏水。
8、(可选)核固红复染细胞核,蒸馏水洗。
9、石蜡切片常规脱水、透明,树胶 封片。
(二) 冰冻切片染色
1、冰冻切片在丙酮-氮仿等扭泄合液内,4℃固定2 - 5min。
2、切片入ACP 孵育液,置于37°C孵育5- 15min。
3、流 水冲洗 2min ,入蒸馏水。
4、入硝酸钻溶液,37°C孵育 5min。
5、流 水冲洗 5min , 入蒸馏水。
6、在上述过程中配制 ALP硫化工作液, 即取试剂 ( C) 用蒸馈水或者去离子水稀释 50 倍,即为 ALP 硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育 1- 2min。
7、流水冲洗 l0mi n ,入蒸馏水。
8、(可选)核固红复染细胞核, 蒸馈 水洗。甘油明胶封片
染色结果:
酶活性部位:黑素硫化铅沉淀
细胞核:根据复染液不同而不同
阴性对照:(可选)
1、ALP对照液为不含底物的孵育液。取相同的切片入 ALP对照液,其余同上。结果为阴性。
2、(备选方案)切片进入 ALP孵育液之前,可先经秧液和5%硫代硫酸钠溶液各3min ,充分水洗后再进行孵育等步骤,可用此法做阴性对照。
注意事项:
1、ALP孵育液、ALP硫化液易失效,最好分成小分储存。一经开启立即使用。
2、ALP硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。
3、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。
4、样本需新鲜,取材后应立即处理,否则会影响酶的活性。
5、组织固定衙在4' C冰箱进行, 时间不宜超过24h, 否则酶活性会减弱或消失。
6、组织在石蜡包 埋是,温度不宜高于56℃。应使用熔点为52- 54℃x的石蜡进行浸蜡,浸蜡时间要短,否则酚活性会减弱或消失。
7、不纯的二甲术会分解黑色沉淀, 宜选用AR 级以上的二甲苯。
8、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
9、本产品仅由于科研,严禁他用。
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