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伊势久生物 碱性磷酸酶-PAS联合染色液 6×50ml 科研专用

价格 767.00/瓶
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000瓶

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基本参数

纯度 / 规格 6×50ml
品牌 伊势久 用途范围 生化研究
包装类型 保质期 4℃,避光,6个月
产品规格 6×50ml 产品名称 碱性磷酸酶-PAS联合染色液
产品用途 生化研究 名称 碱性磷酸酶-PAS联合染色液

碱性磷酸酶-PAS 联合染色液

简介:

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称 ALP AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,

其活性所需最适 pH 9.29.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉膜之内皮。此酶还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜及吞饮小泡。1946McManus 最先使用 PAS 法显示黏蛋白,该法常用来显示糖原和其他多糖。氧化剂能氧化糖类及有关物质中的 1,2-乙二醇基使之变为二醛,醛与 Schiff 试剂能结合成一种品红化合物,产生紫红色。由于氧化剂还可氧化细胞内其他物质,使用时应注意选择好浓度和氧化时间,使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化。

ALP-PAS 联合染色液不仅能够显示碱性磷酸酶活性位点和糖原等物质,亦能区分二者。冰冻切片及石蜡切片均可。

组成:

产品名称

SE009-6×50ml

Storage

试剂(A): ALP 孵育液

50ml

4℃ 避光

试剂(B): Co溶液

50ml

RT

试剂(C): ALP 硫化溶液

2×1ml

RT 避光

试剂(D): 氧化剂

50ml

4℃ 避光

试剂(E): Schiff 试剂

50ml

4℃ 避光

试剂(F): 亚硫酸溶液

50ml

RT

试剂(G): ALP 对照液

10ml

4℃ 避光

说明书

一份

保存条件

4℃,避光保存,6个月有效。

自备材料:

1、蒸馏水

2、温箱或水浴锅

操作步骤(仅供参考)

1、石蜡切片脱蜡至水,冰冻切片直接入水。

2、冰冻切片在丙酮-氯仿等量混合液内,4℃固定 2~5min

3、切片入 ALP 孵育液(阴性对照切片入 ALP 对照液), 置于 37℃温箱。冰冻切片孵育 5-15min,石蜡切片孵育 2-12h。流水洗 2min 后入蒸馏水。

4、入 Co 溶液,置于 37℃温箱染色 5min。 流水洗 5min 后入蒸馏水。

5、上述过程中配制 ALP 硫化工作液,即取试剂(C)用蒸馏水稀释即为 ALP 硫化工作液,即配即用。切片入硫化工作液,孵育 1-2min

6、流水洗 10min 后入蒸馏水。

7、入氧化剂室温氧化 5-10min。蒸馏水换洗。

8、入 Schiff 试剂,置于温箱染色 10-15min

9、亚硫酸溶液:蒸馏水按 1:10 的比例配制亚硫酸工作液,清洗 2min,入蒸馏水洗 5min

10、冰冻切片直接用甘油明胶封片,石蜡切片脱水。常规透明,中性树胶封片。

染色结果:

碱性磷酸酶活性部位黑色

PAS 阳性物质:紫红色

阴性对照(可选)

1、ALP 对照液为不含底物的孵育液。取相同的切片入ALP 对照液,其余同上。结果为阴性。

2(备选方案)切片进入 ALP 孵育液前,可先经碘液和 5%硫代硫酸钠溶液各 3min,充分水洗后再进行孵育等步骤,可用此法作阴性对照。

注意事项:

1、本染色液适用于冰冻切片、石蜡切片。染色过程中注意控制氧化剂的处理时间,否则容易褪色。

2、碱性磷酸酶显色后,经氧化剂应特别小心,严格控制时间,否则褪色。

3ALP 孵育液、ALP 硫化液易失效,最好分成小分储存,一经开启立即使用。

4ALP 硫化液具有腐蚀性和刺激性气味,应小心操作。

5、对冰冻切片染色时,应减少切片在室温暴露的时间。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7、本产品仅由于科研,严禁他用。

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