伊势久生物 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 3×10ml 3×20ml 科研专用
价格 | ¥624.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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纯度 | / | 规格 | 3×10ml |
品牌 | 伊势久 | 用途范围 | 生化研究 |
包装类型 | 瓶 | 保质期 | —20℃,避光,6个月 |
产品规格 | 3×10ml | 产品名称 | 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) |
产品用途 | 生化研究 | 名称 | 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) |
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
简介:
碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称 ALP 或 AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适 pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。
碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同 时偶联法),其原理是在 pH9.2~9.8 的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使 AB-BI 磷酸盐水解,释放出磷酸与萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度 入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨,结果较金属盐沉淀法可靠。
组成:
产品名称
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SE010-4×2ml
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SE010-4×10ml
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Storage
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试剂(A): ALP 固定液
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2ml
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10ml
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RT 避光
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试剂(B):ALP 孵育液
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B1: AS-BI 染色液
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1ml
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5ml
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-20℃ 避光
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B2: FBB 染色液
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1ml
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5ml
|
-20℃ 避光
|
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临用时,取 B1:B2 =1:1 比例混合,即为 ALP 孵育液,即配即用。
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||||
试剂(C): 核固红染色液
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2ml
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10ml
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4℃ 避光
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试剂(D): 甲基绿染色液
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2ml
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10ml
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RT 避光
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说明书
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一份
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保存条件:
-20℃,避光保存,6个月有效。
自备材料:
1、载玻片、湿盒
2、普通光学显微镜
操作步骤(仅供参考):
一、 涂片或切片
1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蜡切片无需固定),水洗。
2、滴加配制好的 ALP 孵育液,放入湿盒中,避光孵育 15~20min,水洗。
3、入核固红染色液或甲基绿染色液复染 3~5min。
4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。
二、 贴壁培养细胞
1、取6孔板或其他容器培养的细胞,弃液,PBS清洗干净。
2、加入ALP固定液固定3min或4%多聚甲醛固定10~15min,PBS清洗。
3、滴加配制好的 ALP 孵育液,放入湿盒中,避光孵育 15~20min,PBS 清洗。
4、入核固红染色液或甲基绿染色液复染 3~5min。
5、PBS 清洗、镜检。
染色结果:
ALP 活性部位:蓝色
细胞核:红色(核固红)或绿色(甲基绿)
血液、骨髓涂片结果判断:
一般以积分报告结果,根据 100 个中性粒细胞阳性颗粒进行 0-4 计分。
细胞分值
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染色特点
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0
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无颗粒
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1
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无颗粒
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2
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中等程度颗粒
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3
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多数颗粒
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4
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充满颗粒
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注意事项:
1、血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。
2、培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。
3、ALP 孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。
4、复染时,核固红染色液或甲基绿染色液二者取其一。
5、每次染色时,应有阳性对照片。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、本产品仅由于科研,严禁他用。
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