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伊势久生物 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法) 3×10ml 3×20ml 科研专用

价格 624.00/瓶
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000瓶

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基本参数

纯度 / 规格 3×10ml
品牌 伊势久 用途范围 生化研究
包装类型 保质期 —20℃,避光,6个月
产品规格 3×10ml 产品名称 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)
产品用途 生化研究 名称 碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)

简介:

碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,简称 ALP AKP)为一类磷酸酯酶,广泛分布于哺乳动物组织内,其活性所需最适 pH 9.2~9.8。此酶主要存在于物质交换活跃之处(细胞膜),如肠上皮和肾近曲小管的刷状缘、附睾上皮之静纤毛、肝的毛细胆管膜以及微动脉和毛细血管动脉部之内皮,还见于内质网、高尔基复合体、吞饮小泡、肠上皮之溶酶体、中性粒细胞之中性颗粒以及平滑肌之细胞膜。

碱性磷酸酶染色液(偶氮偶联法)不是采用金属沉淀法来显示碱性磷酸酶活性,而是采用偶氮偶联法(又称同 时偶联法),其原理是在 pH9.29.8 的碱性条件下,细胞内碱性磷酸酶可使 AB-BI 磷酸盐水解,释放出磷酸与萘酚,后者与偶联重氮盐生成有色产物,定位于细胞质中。该染液可用于血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、梯度 入水后的石蜡切片等的碱性磷酸酶染色,碱性磷酸酶活性部位呈蓝色,位于胞桨,结果较金属盐沉淀法可靠

组成:

产品名称

SE010-4×2ml

SE010-4×10ml

Storage

试剂(A): ALP 固定液

2ml

10ml

RT 避光

试剂(B):ALP 孵育液

B1: AS-BI 染色液

1ml

5ml

-20℃ 避光

B2: FBB 染色液

1ml

5ml

-20℃ 避光

临用时,取 B1:B2 =1:1 比例混合,即为 ALP 孵育液,即配即用。

试剂(C): 核固红染色液

2ml

10ml

4℃ 避光

试剂(D): 甲基绿染色液

2ml

10ml

RT 避光

说明书

一份

保存条件

-20℃,避光保存,6个月有效

自备材料:

1、载玻片、湿盒

2、普通光学显微镜

操作步骤(仅供参考)

一、 涂片或切片

1、血液、骨髓或细胞涂片、冰冻切片、石蜡切片入ALP固定液固定3min(梯度入水后的石蜡切片无需固定),水洗。

2、滴加配制好的 ALP 孵育液,放入湿盒中,避光孵育 1520min,水洗。

3、入核固红染色液或甲基绿染色液复染 35min

4、水洗、镜检或甘油明胶封固后镜检。

二、 贴壁培养细胞

1、取6孔板或其他容器培养的细胞,弃液,PBS清洗干净。

2、加入ALP固定液固定3min4%多聚甲醛固定1015minPBS清洗。

3、滴加配制好的 ALP 孵育液,放入湿盒中,避光孵育 1520minPBS 清洗。

4、入核固红染色液或甲基绿染色液复染 35min

5PBS 清洗、镜检。

染色结果:

ALP 活性部位:蓝色

细胞核:红色(核固红)或绿色(甲基绿)

血液、骨髓涂片结果判断:

一般以积分报告结果,根据 100 个中性粒细胞阳性颗粒进行 0-4 计分。

细胞分值

染色特点

0

无颗粒

1

无颗粒

2

中等程度颗粒

3

多数颗粒

4

充满颗粒

注意事项:

1、血液或骨髓细胞涂片或其他样本均应新鲜,薄厚适宜,及时固定,否则会影响酶的活性。

2、培养细胞染色操作过程中,清洗、染色等步骤都应轻微,以免损伤或丢失细胞。

3ALP 孵育液易失效或降低阳性强度,即配即用,不宜久置。

4、复染时,核固红染色液或甲基绿染色液二者取其一。

5、每次染色时,应有阳性对照片。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

7、本产品仅由于科研,严禁他用。

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