伊势久生物 苏丹Ⅲ酒精饱和溶液 脂类染色 科研用
价格 | ¥195.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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纯度 | · | 规格 | 100ml |
品牌 | 伊势久 | 用途范围 | 生化研究 |
包装类型 | 瓶 | 保质期 | 12个月 |
产品名称 | 苏丹Ⅲ酒精饱和溶液 | 类别 | 脂类染色 |
外观性状 | 液体 | 货号 | SL007 |
福尔根DNA染色液(Feulgen stain)
简介:
脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有 Feulgen 法、甲基绿-派洛孙法、吖啶橙荧光法等,其中最经典的是 Feulgen 法, Feulgen 法是一种经典的酶组织化字法。BIOISCO Feulgen stain 的原理在于:DNA经温和的弱酸(例如盐酸)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与 Schiff 试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有 DNA的部位呈紫红色。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团),所以凡含有DNA的部位,就呈紫红色。但是该水解作用不影响核糖-嘌呤结合键,因此 RNA 用此法处理后则分解,所以该法不适用于证明RNA。
组成:
产品名称
|
SNA007-3×50ml
|
Storage
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|
试剂(A): Schiff reagent
|
50ml
|
4℃避光
|
|
试剂(B):
SO2水
|
B1: 亚硫酸盐溶液
|
50ml
|
RT
|
B2: 弱酸溶液
|
50ml
|
RT
|
|
说明书
|
一份
|
保存条件:
4℃,避光保存,6个月有效。
自备材料:
1、蒸馏水或去离子水
2、系列乙醇
3、加热设备
4、染色缸
操作步骤(仅供参考):
(一) 石蜡切片染色
1、组织固定:Carnoy 固定的石蜡切片较好,10%的福尔马林亦可,不宜使用 Bouin 固定液。
2、弱酸工作液的配制:按照弱酸溶液:蒸馏水=1:4的比例配制,即取弱酸溶液 1 份、蒸馏水 4 份,充分混合,即获得弱酸工作液。
3、石蜡切片脱蜡至双蒸水。
4、室温下在弱酸工作液中浸洗一下。
5、切片放入已预热到60℃的弱酸工作液,孵育8min。
6、切片放入室温的弱酸工作液中冲洗1min。
7、蒸馏水冲洗。
8、切片入 Schiff reagent 内,置于室温暗处染色30~60min。
9、在上述染色过程中,配制 SO2水工作液。按照亚硫酸盐溶液:弱酸溶液:蒸馏水=5:1:94
的比例配制 SO2水工作液,即取亚硫酸盐溶液 1 份、弱酸溶液 1 份、蒸馏水 94 份,
充分混合,即获得 SO2水工作液。即配即用,不易久置。
10、用新鲜配制的 SO2水工作液洗切片 3 次,每次 90s。
11、蒸馏水中洗净。
12、经系列乙醇脱水。
13、二甲苯透明并封片。
(二)冰冻切片染色
1、冰冻切片预处理:先用乙酸 1 份、无水乙醇 3 份混合后,即为固定液,固定 10min。
2、由无水乙醇脱水--逐级下行--双蒸水。
3、弱酸工作液的配制:按照弱酸溶液:蒸馏水=1:4 的比例配制弱酸工作液,即取弱酸溶液1份、蒸馏水4份,充分混合,即获得弱酸工作液。
4、余下步骤同上述石蜡切片染色。
染色结果:
细胞核内DNA:红紫色
阴性对照:
将同样切片经上述步骤, 只有步骤5改为放入室温的弱酸工作液,室温放置 15min。其结果为细胞核 DNA 阴性。
注意事项:
1、水解时间很重要,并且应使用恰当的固定时间。不同的固定液水解时间不一样。
固定液
|
水解时间(min)
|
Carnoy 固定液
|
8min
|
Helly 固定液
|
8min
|
Susa 固定液
|
18min
|
福尔马林
|
8min
|
Zenker 液
|
5min
|
2、注意 Schiff reagent 的纯净程度,若变浅粉红亦可考虑使用,颜色变红则不能用。
3、去除切片上多余的 Schiff reagent 的方法应以 SO2水洗法为好。
4、应作阴性对照试验。
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
6、本产品仅由于科研,严禁他用。
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