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深圳市润联环保科技有限公司
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所在地区:广东省 深圳市
主营产品: 过氧化氢消毒机, 空气消毒器, 消毒液, 过氧化氢空气消毒机, 杀孢子剂,
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进入店铺基本参数
品牌 | 欧菲姆 | 型号 | KV-BOX |
原理 | 多级雾化 | 适用范围 | 检验科 |
种类 | 干雾机 | 产地 | 深圳 |
用途 | 去除污染 | 效果 | 99.99% |
方式 | 多种 | 试剂 | NOVOCIDE |
对于临床分子实验室,气溶胶污染是一个特别值得重视的问题,对气溶胶污染的防范也成为防止实验室污染的重要方面。
气溶胶是指悬浮于气体介质中的粒径一般为0.001μm~100μm的固态或液态微小粒子形成的胶溶状态分散体系。空气与液体的液面摩擦,离心机离心,剧烈摇动反应管,标本容器开盖,移液器反复吸样,污染物外泄等情况均会产生气溶胶。
在临床分子实验室,气溶胶的污染主要是核酸气溶胶污染和微生物气溶胶污染两种类型。核酸气溶胶污染后,最直接的结果就是实验出现假阳性,导致检测失败。而实验室另外一类危险的气溶胶是微生物气溶胶,它是一群形体微小,构造简单的单细胞或接近单细胞的生物悬浮于空气中所成的胶体体系。对于临床分子实验室,病原微生物气溶胶污染的来源是患者标本(如患者的体液、血液、分泌物等)。患者标本中含有的病原微生物,产生气溶胶并扩散到空气中,这些气溶胶在空气中长时间悬浮,并随气流扩散至实验室不同的地方,如仪器设备、操作台面等,导致实验室发生污染。
这些病原微生物气溶胶,如被在场的易感宿主吸入则可能发生人员感染。因此,虽然检验人员没有接触患者,但是在操作感染性材料过程中产生了气溶胶,并发生了扩散,工作人员吸入了感染性的气溶胶粒子,便可能发生感染。
PCR中的气溶胶污染来的悄无声息、防不胜防。
核酸气溶胶污染的来源:
(一) 标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。
(二) PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中,由于加样枪、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。
(三) PCR扩增产物污染:这是PCR反应中最主要最常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大(一般为1013拷贝/ml),远远高于PCR检测数个拷贝的极限,所以极微量的PCR产物污染,就可造成假阳就可形成假阳性。
还有一种容易忽视,最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染;在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶,在操作时比较剧烈地摇动反应管,开盖时、吸样时及污染进样枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染。据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝,因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。
(四)实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的检验室,这个问题也比较常见,因为克隆质粒在单位容积内含量相当高,另外在纯化过程中需用较多的用具及试剂,而且在活细胞内的质粒,由于活细胞的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力,其污染可能性也很大。
PCR实验室污染的表现有哪些?
阳性标本数量异常增多,所有同批次标本及阴阳对照全部为阳性;除了Ct值靠前的标本其余标本及阴性对照Ct值接近临界值,都有微弱翘尾。
PCR实验室如何防止气溶胶污染?
1.全面规范的操作
1.1 PCR操作时,实验人员应该严格遵守SOP操作规程;
1.2 每次实验前均准备两个阴性对照(均以水作为模板,一个与样品参与核酸提取,另一个不参与提取,仅在配置扩增体系时加入),以便对实验室气溶胶污染情况进行监测;
1.3 使用一次性吸头,吸头不要长时间暴露于空气中;
1.4 操作多份样本时,制备反应混合液,先将dNTP、缓冲液、引物和酶混合好,然后分装,这样既可以减少操作,避免污染,又可以增加反应的精确度;
1.5 PCR试剂、样本及PCR产物分开保存,不应放于同一冰盒或同一冰箱;
1.6 轻拿轻放,开盖要轻,样本存放时要密封严实,以防外溢;
1.7 使用镊子夹用离心管或DNA吸附柱,不要直接用手拿取,注意不要碰触离心管内盖和吸附柱下端开口处;
1.8 模板最后加入,在加入模板时,应该按照“阴性对照-待测样本-阳性对照”的加样顺序,操作上应遵循“开管盖-加模板-盖管盖”的原则,保证管与管之间不会交叉污染;
2.实验室分区
PCR实验室按 《医疗机构临床扩增实验室管理办法》 (卫办医政发〔2010〕194号)规定进行分区,工作和空气流向都严格按照试剂准备区→标本制备区→PCR扩增区→产物分析区。
3.提升清洁和消毒方式
做好实验室的清洁及消毒工作是防止实验室内发生气溶胶污染的有效途径。实验室的清洁范围包括工作台面(试验台、超净台和生物安全柜等)、仪器设备表面(离心机的转头、涡旋仪、扩增仪的样品槽、移液器等)、重复使用的工具或器皿等的清洁。
实验开始前后,先用专门的核酸污染去除剂将上述区域及仪器的表面擦拭一遍,再用75%乙醇擦洗以去除残留物(有些核酸去除剂不用再清除残留,例如诺沃赛德),待酒精挥发后方可进行试验。这样可以有效清除它们表面附着的各种污染物。同时定期对实验室进行紫外灯照射消毒,对于小片段200bp以下的核酸气溶胶污染紫外灯照射没有效果,必须使用专业的核酸去除仪配合去除剂散发成干雾状态弥散充满整个实验室环境空间进行一个大气溶胶污染清除,代替紫外线。此方法也特别适合核酸试剂生产车间去除引物气溶胶污染,大范围快速彻底的处理方案。
欧菲姆KV-BOX十五年干雾技术累积,打造顶级的气溶胶污染去除仪,真正的专业性核酸气溶胶污染解决方案服务商。无论是小片段核酸污染还是大片段核酸污染都通通轻松解决,一直专注PCR实验室及检测试剂车间污染清除及配套成熟的处理辅助措施,容易实施,可监测,可验证。
欧菲姆KV-BOX气溶胶去除仪采用冷蒸发超文丘里技术,将液态核酸去除剂化成1-3um的颗粒状气体,均匀扩散在空气中,无死角覆盖在整个核酸实验室,并快速吸附空气中的气溶胶核酸片段,分解掉核酸DNA/RNA污染源。
欧菲姆核酸去除仪具备以下优点:
1)纳米级干雾肉眼不可见,渗透性好,无孔不入;
2)智能化控制系统,电脑芯片可升级系统,无线远程操作,操作简单容易;
3)拥有CE/ISO等国内外认证资质,品质过硬;
4)能过快速有效分解掉DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物质,全面解决核酸实验室环境空气污染和核酸片段气溶胶污染;
5)单位使用量少,使用成本低;
6)作用时间短,2小时内全部清理整个核酸实验室,节省人力擦拭;
7)材料兼容性好,对其它设备仪器和材料没有腐蚀性影响,人员安全。
深圳市润联环保科技有限公司
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钟成
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