北京普利莱基因技术有限公司

主营产品： WB蛋白相关所有试剂, 抗体, 转染试剂, 染色液,

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普利莱液体样本总谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒货号: E2005（厂家直销批发）

价格	￥480/次
起订量	≥100
所在地	北京辖区	可售量 10000次

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基本参数

品牌	普利莱	产品品牌	APPLYGEN
产品名称	普利莱液体样本总谷胱甘肽（GSH）检测试剂盒	英文名称	无
产品规格	100次	储存	具体根据说明书操作
储存周期	根据说明书具体操作	供货能力	现货
可售卖地	全国	用途	科研实验专用
货号	E2005

普利莱液体样本总谷胱甘肽（GSH）检测试剂盒货号: E2005

货号	产品名称	规格	价格（元）
E2005	液体样本总谷胱甘肽检测试剂盒	100次	480

描述：液体样本总谷胱苷肽检测试剂盒（Total Glutathione Assay Kit）是一种灵敏简单的检测总谷胱甘肽的试剂盒。总谷胱甘肽包括还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）。GSH 是细胞中巯基的主要来源，对于维护蛋白巯基适当的氧化还原状态有重要作用，动物细胞中GSH占总谷胱甘肽比例约90-95%。

规格：100次

储存：按说明书要求保存 12个月有效

操作步骤：

1.样品的准备

蛋白沉淀试剂溶液配制：请于样本准备前，将试剂盒中提供的0.5g蛋白沉淀试剂S溶于10ml纯水中，如果一次实验不需要使用10ml，请根据需要称取配制成5%的水溶液。

血浆样品或红细胞的准备：取新鲜血液，600g离心10分钟，上清为血浆。对于沉淀中红细胞，利用PBS洗涤2次。取约50μl的血浆或红细胞，加入50μl的蛋白沉淀试剂S溶液，充分涡旋，冰浴10分钟。4℃，10000g离心10分钟。取上清用于总谷胱甘肽的测定。不立即测定的样品可以-70℃保存。血浆样品可取10μl直接测定或利用蛋白沉淀试剂S溶液稀释2-5倍后测定，红细胞样品一般需利用蛋白沉淀试剂S溶液稀释5-10倍后测定。

2.试剂盒的准备

2.1 GSH储备液的配制：在本试剂盒提供的6mg GSH中加入1ml的纯水，溶解并混匀，即为GSH储备液，浓度为20mM。

2.2 DTNB储备液的配制：在本试剂盒提供的4mg DTNB中加入1ml本试剂盒提供的DMSO溶解并混匀，即为DTNB储备液，浓度为10mM。

2.3 NADPH储备液的配制：在本试剂盒提供的5mg NADPH中加入1ml纯水，溶解并混匀，即为NADPH储备液，浓度为5mg/ml。

2.4 总谷胱甘肽检测工作液的配制：根据待测样品数配制适当量的总谷胱甘肽检测工作液，表中试剂按比例混合后即为总谷胱甘肽检测工作液。

2.5 NADPH工作液的配制：取NADPH储备液，利用总谷胱甘肽检测缓冲液稀释10倍，配制为0.5mg/ml的NADPH工作液。每检测一个样品需要50μl的0.5mg/ml NADPH。

3.标准品的准备

将20mM的GSH储备液用蛋白去除试剂S溶液稀释成20、10、5、2.5、1.25、0.62μM浓度的GSH溶液，用于标准曲线测定。由于GSH在蛋白去除S溶液中不够稳定，每次测定需新鲜配制系列标准品稀释液。

4、测定方法

4.1使用96孔板，依次加入总谷胱甘肽检测工作液、样品或标准品后，混匀，25℃或室温孵育2分钟。

4.2 参考上表，各孔加入NADPH工作液50μl，25℃孵育20分钟。

4.3 各孔加入NADPH工作液50μl启动谷胱甘肽还原酶反应后，立即开始计时，并在5、10、20分钟等时间点测定A412nm。如果样品吸光度较低，可适当降低标准品浓度，延长反应时间进行样品测定。