北京普利莱基因技术有限公司
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北京普利莱基因技术有限公司
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普利莱 组织冰冻切片OCT包埋剂 货号: C1400(厂家直销批发)

价格 160/ml
起订量 ≥120
所在地 北京 辖区 可售量 10000ml

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基本参数

品牌 普利莱 产品品牌 APPLYGEN
产品名称 普利莱 组织冰冻切片OCT包埋剂 英文名称
产品规格 120ml 储存 具体根据说明书操作
储存周期 根据说明书具体操作 供货能力 现货
可售卖地 全国 用途 科研实验专用
货号 C1400
普利莱 组织冰冻切片OCT包埋剂 货号: C1400
货号 产品名称 规格 价格
C1400 组织冰冻切片包埋剂 (Tissue OCT-Freeze Medium ) 100ml 160元

描述:冷室、组织块、包埋剂、切片刀之间的温度平衡于优化的切片温度(optimum cutting temperature, OCT)附近,是获得高质量冰冻切片的保证。不同的组织因构成各异而具有不同的OCT温度。当冰冻组织在接触刀刃的瞬间,局部温度短暂升高发生局部融化;随后切开的组织薄片暴露于冷室被再次骤冷冰冻。这种融化-冰冻温度变化是切片皱褶或断裂的内在原因,在此基础上切片的软硬度和厚薄度进一步影响皱褶产生(1)。在切片过程中,冰冻包埋剂也须历经与组织类似的温度变化,这就要求包埋剂必须具有与组织块相近的冰冻速度和软硬韧度。

我公司提供的Tissue OCT-Freeze Medium是由高分子聚合物组成的无色透明粘稠液体,骤冷时固化,其冰冻速度和软硬韧度与组织细胞相近,因而能保证优化的OCT温度,并具有支持填充、减少皱褶和断裂等作用。可任意添加于切片机的样品架以支持和固定样品。

与广为使用的Tissue-Tek OCT Compound包埋剂相比,普利莱的包埋剂的突出优点是:支持超薄和超厚(2~100 μm)冰冻切片并减少皱褶和断裂。不影响后续免疫组化、原位杂交、病理染色等操作,并可经由水或PBS冲洗完全去除,是理想的组织冰冻包埋剂。

适用:组织和培养细胞的冰冻包埋固定。用于临床快速病理染色诊断、免疫组化、原位杂交。

组成:120 ml,4oC 1年。可常温放置。常温和4oC为无色透明粘稠液体,温度降低时逐渐变粘稠并固化。

使用前标本准备:

冰冻切片标本可采用 (1) 新鲜组织,特点是快速,但未用完的包埋组织块不能保存;(2) 使用经典方法10%甲醛或4%多聚甲醛室温2~10分钟固定过的组织,优点是既不影响后续步骤,包埋组织块又可长期冰冻保存,随时再用,缺点是步骤稍繁。(3) 培养细胞,800g离心10分钟收集培养细胞,用吸头或针头拨出细胞沉淀块,放入OCT包埋剂内。

应避免采用降低组织冰点的甲醇乙醇固定。本产品说明书不提供关于组织取材、渗透、固定、冰冻切片等技术信息。用户应阅读冰冻切片机操作手册,参考各种常规技术方法。

使用方法:

1. OCT包埋:用水或PBS冲洗固定的组织块,用吸水纸吸去液体。在盛标本的包埋模子内,挤出适量的包埋剂,放入组织和细胞沉淀块,加包埋剂完全埋没组织块。可用2层铝箔纸折叠成简易的模子。如有气泡可用针头或吸头吸出。

2. 冰冻:将盛有组织细胞和包埋剂的模子,正置于切片机冷室内冰冻10分钟。此时,包埋剂为乳白色固体。包埋剂和组织冷冻时体积略有膨胀,因此模子应正置,由底部向顶部进行冰冻。也可将OCT包埋的组织置于干冰或液氮,或放入-40~-70 oC冰箱冰冻固化保存,用前取出置于切片机冷室内平衡温度(否则损坏刀)

3.切片:可在切片机的组织卡盘(chuck)上加少许包埋剂并在其固化前嵌入组织块,然后再于组织周围加入少许包埋剂使其稳定。进行常规切片,厚度范围2~100 μm。

4. 收片后,用适量水或PBS冲洗切片3次,每次2?3分钟,洗除包埋剂。而后可进行常规组化染色、病理染色、原位杂交。未用完的组织块可冷冻储存。

附表为新鲜组织的冰冻切片OCT温度。固定过的组织的OCT温度升高相应5~10°C

组织

°C

组织

°C

组织

°C

子宫刮出物

-7

?15

子宫颈

?20

?10

?16

卵巢

?20

?10

肌肉

?16

前列腺

?20

?10

结蹄组织

?16

消化道

?20

睾丸

?10

皮肤

?16

骨髓

?20

甲状腺

?10

?18

连脂肪皮肤

?25

?13

胰腺

?20

乳腺

?30

淋巴结

?15

子宫

?20

网膜脂肪

?35

通常折中采用?20°C。肝脑脾等组织的OCT切片温度应在?10 oC,否则易碎。脂肪或含脂肪多的组织的OCT切片温度更低,否则易皱褶。

常见问题及解决方案:

易碎

冷冻过快,或标本太大

组织、包埋块从支架脱落

包埋剂不足,组织在包埋剂中的位置过偏

组织向前推进但不能顺利切片

刀和组织未固定紧,刀的角度不合适,组织未完全冷冻

切片卷曲

Anti-roll plate不干净,切片太薄,刀钝

切片撕裂

组织过分冷冻,刀口受损、不洁

切片融化

冷室和刀的温度不正确

刀上有雾

切片机开盖时间过长

切片粘在 anti-roll plate

温度不正确,anti-roll plate不洁

切片歪向一侧

刀口钝、受损,anti-roll plate受损

切片从玻片脱落

没用玻片粘附剂,切的是固定组织、脂肪含量高的标本,操作粗糙

切片水平裂痕

切片时标本太冷

参考文献:

Pearse AGE.Histochemistry, theoretical and applied, vol. 1: preparative and optical technology. 4th Ed. Edinburgh, UK: Churchill Livingstone, 1980.




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