苏州北科纳米科技有限公司
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狂犬病毒抗体检测试剂盒

价格 0/盒
起订量 ≥1
所在地 江苏 苏州 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 99% 规格
品牌 北科纳米 产地 江苏
定制加工 用途 科研

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  • 介绍

    狂犬病毒(Rabies virus, RBV)抗体检测试剂盒用于检测猫、犬等动物血清中的狂犬病毒抗体,用于评估狂犬病毒疫苗免疫状况。

    本试剂盒采用阻断ELISA法,在酶标板条微孔上预包被狂犬病毒抗原。在试验中,加入稀释后的待检血清,经过温育后,若样品中含有狂犬病毒特异性抗体,则与包被板上的抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标的抗狂犬病毒单抗,样本中的抗体阻断了单抗与包被板上抗原的结合;经洗涤除去未结合的酶结合物;在微孔中加入TMB底物液,经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗体含量成反比,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。

    组份

    1

    抗原预包被板条

    1/2块

    6

    终止液

    11ml

    2

    酶结合物

    11/22ml

    7

    阴性对 照

    1/2ml

    3

    10倍浓缩洗涤液

    100ml

    8

    阳性对 照

    0.5ml/1ml

    4

    显色液

    11/22ml

    9

    封板膜

    2/4张

    5

    样本稀释液

    100ml

    10

    说明书

    1份

    需自备的设备及试剂

    1.微量移液器:10μl-100μl、100μl-1000μl。

    2.一次性移液器吸头。

    3.量筒:500ml。

    4.96孔板酶标仪。

    5.蒸馏水或去离子水。

    6.洗瓶或洗板机。

    样品制备

    取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。

    洗涤液的准备

    浓缩洗涤液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。

    注意事项

    1.试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀,使用后放回2-8℃。

    2.不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。

    3.终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。

    4.TMB(显色液)不要暴露于强光和避免接触氧化剂。

    5.检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃)。

    6.所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。

    7. 严格遵守操作说明可以获得好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。

    8.抗原包被板为一次性用品,不得重复使用;

    操作步骤

    1.每次试验均设置阳性对照1孔、阴性对照2孔,阴、阳性对照不用稀释,直接取100ul加入反应孔。

    2.将样品稀释液按90ul/孔加入到微孔反应板内,之后将待检样品血清按10ul/孔加入孔内并吹打混匀(移液器枪头请勿混用);

    3.盖上封板膜(可按实际需要自行裁剪),置37℃温育60分钟。

    4.小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作浓度洗涤液每孔加250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复4-6次,然后在干净吸水纸上拍干。

    5.每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。

    6.小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤4-6次, 方法同4。切记之后在干净吸水纸上拍干。

    7.每孔加显色液100μl,混匀、盖上封板膜37℃闭光显色15分钟。

    8.每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。

    结果判定

    用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度OD值。

    试验成立的条件是

    阴性对照(N)OD值0.5,同时阳性对照(P)阻断率50%;

    计算方法:

    PI (阻断率)= 1 —(样品OD值 ÷ 阴性OD均值)

    阴阳性判断:

    PI(阻断率)40%则判断为阳性;

    PI≤40%则判断为阴性。

    注:(PI=40%相当于抗体滴度0.5IU/ml)


    有效期

    贮存方法:2 - 8oC下贮存。

    有效期:12个月。

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