苏州北科纳米科技有限公司
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猪瘟抗体检测试剂盒

价格 0.00/盒
起订量 ≥1
所在地 江苏 苏州 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 99% 规格
品牌 北科纳米 产地 江苏
加工定制 用途 科研


介绍

猪瘟(classical swine fever,CSF)抗体检测试剂盒用于检测猪血清中的猪瘟抗体,评估猪场猪瘟疫苗免疫状况。

本试剂盒采用阻断ELISA法,在酶标板条微孔上预包被猪瘟抗原。在试验中,加入稀释后的待检血清,经过温育后,若样品中含有猪瘟抗原特异性抗体,则与包被板上的抗原结合,经洗涤除去未结合的抗体和其他成分后;再加入酶标的抗猪瘟抗体,样本中的抗体阻断了酶标抗体与包被板上抗原的结合;经洗涤除去未结合的酶结合物;在微孔中加入TMB底物液,经酶催化产生的蓝色信号与样本中的抗体含量成反比,加入终止液终止反应后,用酶标仪450nm波长测定反应孔中的吸光度A值。


组份

1

抗原预包被板条

1/2块

6

终止液

6/11ml

2

酶结合物

11/22ml

7

阴性对照

1/2ml

3

10倍浓缩洗涤液

50/100ml

8

阳性对照

0.5ml/1ml

4

显色液

11/22ml

9

封板膜

2/4张

5

样本稀释液

100ml

10

说明书

1份


需自备的设备及试剂

1.微量移液器:10μl-100μl、100μl-1000μl。

2.一次性移液器吸头。

3.量筒:500ml。

4.96孔板酶标仪。

5.蒸馏水或去离子水。

6.洗瓶或洗板机。


样品制备

取动物全血,按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血。

洗涤液的准备

浓缩洗涤液使用前应恢复至室温,如有盐结晶,摇动使结晶的盐溶解,然后用蒸馏水或去离子水作10倍稀释。稀释好的洗涤液可在4℃存放一周左右。


注意事项

1.试剂盒使用前各试剂应平衡至室温,应将试剂盒各组份放置室温至少1小时以上。使用前应摇匀,使用后放回2-8℃。

2.不同品种、不同批号试剂盒的试剂组分不得混用,使用试剂时应防止试剂污染。

3.终止液对皮肤和眼可能有刺激性,使用时应该注意防护。

4.TMB(显色液)不要暴露于强光和避免接触氧化剂。

5.检测板拆封后应避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥剂放于自封袋中,并尽快置于2-8℃)。

6.所有废弃物在丢弃之前应合理处理以免污染。

7. 严格遵守操作说明可以获得好的结果。操作过程中移液、定时和洗涤等的全部过程必须精确。

8.抗原包被板为一次性用品,不得重复使用;


操作步骤

1.每次试验均设置阳性对照1孔、阴性对照2孔,阴、阳性对照不用稀释,直接取100ul加入反应孔。

2.将样品稀释液按80ul/孔加入到微孔反应板内,之后将待检样品血清按20ul/孔加入孔内并吹打混匀(移液器枪头请勿混用);

3.盖上封板膜(可按实际需要自行裁剪),置37℃温育60分钟。

4. 小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,使用工作浓度洗涤液每孔加250ul,后甩去孔内液体,以上步骤重复4-6次,然后在干净吸水纸上拍干。

5.每孔加酶结合物100μl,盖上封板膜,置37℃温育30分钟。

6.小心揭开封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗涤4-6次, 方法同4。切记之后要在干净吸水纸上拍干。

7.每孔加显色液100μl,混匀、盖上封板膜37℃闭光显色

15分钟。

1.每孔加终止液50μl,使反应终止,10分钟内测定结果。


结果判定

用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度OD值。

试验成立的条件是

阴性对照(N)OD值0.5,同时阳性对照(P)阻断率50%;

计算方法:

PI (阻断率)= 1 —(样品OD值 ÷ 阴性OD均值)

阴阳性判断:

当PI(阻断率)40%则判断为阳性;

当PI=40%且PI30%为可疑;

当PI=30%则判断为阴性。


贮存方法:2 - 8oC下贮存。

有效期: 12个月。

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