伊势久生物 植物膜蛋白提取试剂盒 10T 100T 科研专用
价格 | ¥248/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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上海舟福科贸有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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基本参数
纯度 | / | 规格 | PC013-10T |
品牌 | 伊势久生物 | 产品名称 | 植物膜蛋白提取试剂盒 |
名称 | 植物膜蛋白提取试剂盒 | 保质期 | 1年 |
产品用途 | 生化研究 | 包装类型 | 盒 |
类别 | 配液类 | 保存条件 | 2-8℃ |
植物膜蛋白提取试剂盒
产品简介:
植物膜蛋白提取试剂盒是一种提取和稳定膜蛋白的试剂盒。该试剂盒可以从植物组织中高效提取和稳定G偶联蛋白受体(GPCR)和其他膜相关蛋白,同时保持长期的受体完整性。萃取剂可以将受体包裹在去污剂胶束中,在4°C下储存长达1周,在-20°C下储存1个月时仍具有受体功能。在提取后如何稳定天然和功能形式的受体存在许多挑战,这使得在细胞膜外进行研究变得极为困难。这种提取试剂能够在1-2小时内从植物细胞或组织中有效提取功能受体。大多数功能性GPCR分析必须在提取受体后立即进行,随着时间的推移活性会迅速下降。本试剂盒提高了受体的稳定性,为研究人员提供了更大的样品灵活性。
本产品仅适用于科研实验,不可做他用。
产品组成:
组分名称 |
PC013-10T |
PC013-100T |
Storage |
缓冲液A |
5×1ml |
50 ml |
2-8℃ |
10×萃取剂B |
0.5ml |
5 ml |
2-8℃ |
稀释液C |
5×1ml |
50ml |
2-8℃ |
还原剂粉末D |
6mg |
60mg |
2-8℃ |
100×蛋白酶抑制剂E |
0.1ml |
1ml |
2-8℃ 长期保存于-20℃ |
说明书 |
一份 |
有效期:
2-8℃保存,12个月有效,100×蛋白酶抑制剂E-20℃长期保存。
操作步骤(仅供参考):
1)从不同样品类型中提取膜蛋白(植物组织)
1. 称取还原剂粉末0.5 mg,加入0.5 ml缓冲液,配置成1mg/ml还原剂的缓冲液(现配现用)。
2. 将植物组织用液氮研磨成粉末。称取粉末1g,加入0.5ml预冷的配置好的缓冲液重悬,并在冰上孵育20min(期间上下颠倒)。
3. 然后加入0.5ml 1×萃取剂(用稀释液将10×萃取剂稀释10倍到1×),上下混匀后在冰上萃取2小时。(为获得更好的萃取效果,在4°C下持续混匀)
4. 在4°C下以16,000×g离心20分钟。小心取出含有稳定蛋白受体的上清液,然后转移到新试管中。
5. 立即进行下游应用或将提取物等分试样储存,以备将来在4°C下使用长达1周或在-20°C下使用长达1个月,使受体功能损失最小。
2)从不同样品类型中提取膜蛋白(不含细胞质蛋白)
1. 将植物组织用液氮研磨成粉末。取1mg粉末,加入1×PBS重悬,4°C下以16,000×g离心20分钟。
2. 去掉上清,沉淀加入0.5ml的1mg/ml还原剂的缓冲液(现配现用,称取还原剂粉末0.5 mg,加入0.5 ml缓冲液,配置而成。),重悬,并在冰上孵育20min(期间上下颠倒)。
3. 然后加入0.5ml 1×萃取剂(用稀释液将10×萃取剂稀释10倍到1×),上下混匀后在冰上萃取2小时。(为获得更好的萃取效果,在4°C下持续混匀)
4.在4°C下以16,000×g离心20分钟。小心取出含有稳定蛋白受体的上清液,然后转移到新试管中。
5.立即进行下游应用或将提取物等分试样储存,以备将来在4°C下使用长达1周或在-20°C下使用长达1个月,使受体功能损失最小。
排除故障:
现象 |
可能的原因 |
建议操作 |
裂解液浓度过低。 |
组织太老 |
选取幼嫩组织 |
研磨不充分 |
液氮研磨成细粉 |
|
称取量不够 |
按比例称取材料(如果有0.5g材料,加入0.25ml缓冲液和0.25ml萃取液。 |
|
裂解液粘稠 |
提取缓冲液的体积太低 |
增加提取缓冲液的体积(将2 ml提取缓冲液用于2g植物材料) |
受体产量低 |
细胞膜溶解性差 |
在加入缓冲液孵育之前,请使用充分研磨,或者加入缓冲液后再用组织匀浆器匀浆。 |
细胞破碎过于激烈 |
请勿使用超声进行细胞破碎。改为使用液氮研磨或者Dounce匀浆器。 |
注意事项:
1.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2.本产品仅供科研使用,严禁它用。
上海舟福科贸有限公司
联系人:
卢经理
服务热线:
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太阳山路188弄2号101
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