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伊势久生物 单宁含量检测试剂盒 分光光度法 50T/48S 科研专用

价格 640/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂单宁含量检测试剂盒 分光光度法 50T/48S
名称 生化试剂单宁含量检测试剂盒 分光光度法 50T/48S 货号 OX011
包装类型 测定原理 单宁在碱性环境下与磷钼酸反应,生成蓝色化合物,在760nm处有最大吸收峰
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

单宁含量试剂盒说明书

分光光度法 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物,又称植物多酚。具有独特的化学性质和多种生理活性,如能与蛋白质、生物碱、多糖结合;能与多种金属离子发生络合或静电作用;具有止血、抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。

测定原理:

单宁在碱性环境下与磷钼酸反应,生成蓝色化合物,在760nm处有最大吸收峰。

试剂的组成和配制:

产品名称

OX011-50T/48S

Storage

试剂一:液体

10ml

4℃

试剂二:液体

8ml

4℃

说明书

一份

需自备仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

单宁的提取:

按照组织质量(g):蒸馏水体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml蒸馏水),充分匀浆后转移到EP管中,80℃水浴提取30min8000 g25℃离心10 min,取上清液待测。

测定步骤:

1、分光光度计预热30min以上,调节波长至760nm,蒸馏水调零;试剂一和试剂二37℃预热10min以上;

2、操作表:

试剂名称(μl

对照管

测定管

样本

25

蒸馏水

675

650

试剂一

175

175

混匀,室温静置5min

试剂二

150

150

混匀,室温静置30min760nm处读取吸光值AΔA=A测定-A对照,对照管只要做一管。

单宁含量计算

1、标准条件下测定的回归方程为y = 1.6418x0.0134x为标准品浓度(mg/ml)yΔA(A测定-A对照)

2、按样本鲜重计算:

单宁含量(mg /g鲜重)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷W×V1÷V2=0.609×(ΔA-0.0134) ÷W

3、按样本蛋白浓度计算:

单宁含量(mg/mg prot)= [(ΔA-0.0134) ÷1.6418×V1]÷(V1×Cpr)=0.609×(ΔA-0.0134) ÷Cpr

V1:加入样本体积,0.025mlV2:加入提取液体积,1mlCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本鲜重,g

注意:

1、ΔA控制在0.02-0.8范围内,若ΔA大于0.8,将样本提取上清液用蒸馏水稀释10倍后检测,计算公式中乘以相应稀释倍数。

2、标准曲线线性范围为:0.025mg/ml-0.5mg/ml

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