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伊势久生物 花青素还原酶 ANR 检测试剂盒 分光光度法50T/48S 科研专用

价格 3200/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂花青素还原酶 ANR 检测试剂盒 分光光度法50T/48S
名称 生化试剂花青素还原酶 ANR 检测试剂盒 分光光度法50T/48S 货号 AO021
包装类型 测定原理 花青素还原酶在NADPH存在的条件下作用于飞燕草色素转变为表没食子儿茶素和NADP
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

花青素还原酶(anthocyanidin reductaseANR)试剂盒说明书

分光光度法 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

花青素还原酶是黄酮合成途径中的关键酶,在植物体内起非常重要的调控作用,对花青素还原酶的调控机制研究有利于从基因水平改变植物的品质。

测定原理:

花青素还原酶在NADPH存在的条件下作用于飞燕草色素转变为表没食子儿茶素和NADP,使反应体系在340nm处的吸光值下降,吸光值下降速率反应了花青素还原酶的活性。

组成:

产品名称

AO021-50T/48S

Storage

提取液:液体

50ml

4℃

试剂一:液体

40ml

4℃

试剂二:粉剂

1

4℃避光

试剂粉剂

1

4℃避光

试剂四:粉剂

1

4℃避光

说明书

一份

试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加3ml蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂三:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加3ml蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

试剂四:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加3ml蒸馏水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

自备仪器和用品:

天平、研钵、低温离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、蒸馏水。

酶液提取

1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

2.培养液等液体:直接检测。

测定操作表

试剂名称

测定管

试剂一(μl

750

试剂二(μl

50

酶液(μl

100

试剂三(μl

50

试剂四(μl

50

充分混匀,于1ml石英比色皿测定340处吸光值A1,然后在40℃温育20min后,再测定340nm处吸光值A2△A=A1-A2

酶活性计算公式:

1)按照蛋白浓度计算

酶活性定义40℃pH6.5条件下,每毫克蛋白每分钟催化1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。

ANR活性(nmol/min/mg prot= ΔA÷ε×d×V反总÷(V×Cpr) ÷T

= 80.39×ΔA÷Cpr

2)按照样本质量计算

酶活性定义40℃pH6.5条件下,每克组织每分钟催化1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。

ANR活性(nmol/min/g 鲜重)= ΔA÷ε×d×V反总÷(W ×V÷V样总) ÷T

= 80.39×ΔA÷W

(3)按液体体积计算

酶活性定义40℃pH6.5条件下,每毫升液体每分钟催化1nmolNADPH定义为一个酶活力单位。

ANR活性(nmol/min/ml= ΔA÷ε×d×V反总÷V÷T

= 80.39×ΔA

V反总:反应体系总体积,1mlεNADH摩尔消光系数,6.22×103L / mol /cmd:比色皿光径,1cmV样:加入样本体积,0.1mlV样总:加入提取液体积,1mlT:反应时间,20minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本质量,g

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