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伊势久生物类黄酮糖基转移酶 UFGT 检测试剂盒 HPLC法50T/48S HPLC法100T/96S 科研专用

价格	￥3640/盒
起订量	≥1
所在地	上海上海	可售量 10000盒

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基本参数

纯度	/	规格	50T/48S
品牌	伊势久	产品名称	生化试剂类黄酮糖基转移酶 UFGT 检测试剂盒 HPLC法50T/48S
名称	生化试剂类黄酮糖基转移酶 UFGT 检测试剂盒 HPLC法50T/48S	货号	AO023
包装类型	盒	测定原理	类黄酮糖基转移酶催化花青素与尿苷二磷酸葡萄糖反应产生花青苷，主要以矢车菊素3-葡萄糖苷（C3G）形式
用途范围	生化研究	类别	生化试剂盒

类黄酮糖基转移酶（UFGT）试剂盒说明书

HPLC法50T/48S

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

类黄酮是植物次生代谢产物，糖基化是类黄酮基本结构形成的最主要的修饰反应之一，提高了类黄酮苷元的化学稳定性，这一过程主要由类黄酮糖基转移酶催化的，使类黄酮-OH与UDPG反应，是黄酮合成途径中的关键酶。

测定原理：

类黄酮糖基转移酶催化花青素与尿苷二磷酸葡萄糖反应产生花青苷，主要以矢车菊素3-葡萄糖苷（C3G）形式存在，用HPLC检测产物可反映类黄酮糖基转移酶的酶活性。

组成：

产品名称	AO023-50T/48S	Storage
提取液：液体	50ml	4℃
试剂一：粉剂	1瓶	4℃避光
试剂二：液体	5ml	4℃
试剂三：液体	8ml	4℃
标准品	1支	-20℃
说明书	一份

试剂一：粉剂×1瓶，4℃避光保存。临用前加全部试剂三溶解。

自备仪器和用品：

天平、研砵、离心机、恒温水浴锅、100目筛、高校液相色谱、针头过滤器（水系、0.22μm）、滤膜（水系、0.45μm）、耐水C18柱（4.6×250mm）、样品瓶、甲酸、甲醇（色谱级）、超纯水

酶液提取:

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(ml)为1：2~5的比例（建议称取约0.5g组织，加入1ml提取液），进行冰浴匀浆。10000g ，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

实验前的准备工作：

1、检测产物制备

	对照管	测定管
样本（μl）	100	100
试剂二（μl）	100
试剂一（μl）		150
充分混匀，30℃反应30min
试剂一（μl）	150
试剂二（μl）		100
充分混匀，10000g，4℃，离心10min，取上清过0.45μm水系滤头，待检测。

2、将500 ml超纯水和500 ml甲醇用0.45 μm的滤膜抽滤，以除去溶剂中的杂质，防止堵塞色谱柱。（注：蒸馏水用水系滤膜抽滤，甲醇用有机系滤膜抽滤）。

3、流动相的配制：流动相A为1.6%甲酸水溶液；流动相B为1.6%甲酸甲醇溶液。

4、将配好的流动相超声30分钟，以脱去溶剂中的气泡，防止堵塞色谱柱。

5、标准品的配制：

在标准品中加入1ml甲醇，配成5μmol /ml母液，将母液用甲醇分别稀释成2μmol/ml，1μmol/ml、0.5μmol/ml、0.25μmol/ml、0.125μmol/ml的标准品溶液。针头式过滤器过滤后待测。

测定操作表：

1. 开启电脑、检测器和泵，安装上色谱柱，打开软件，在方法组中设置进样量10 μl，梯度洗脱为0~5min，85%A 15%B; 5~10min，85%A 15%B; 10~30min，80%A 20%B; 30~30.1min， 60%A 40%B; 30.1~40min，0%A 100%B。流速1ml/min，柱温30℃，走样时间为50min，检测波长530nm，设置完毕保存方法组。