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伊势久生物 多胺氧化酶 PAO 检测试剂盒 微量法 100T/96S 科研专用

价格 1750/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 100T/96S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂多胺氧化酶 PAO 检测试剂盒 微量法 100T/96S
名称 生化试剂多胺氧化酶 PAO 检测试剂盒 微量法 100T/96S 货号 AO031
包装类型 测定原理 PAO催化多胺氧化产生过氧化氢,在过氧化物酶存在的条件下与底物显色,在550nm下有特征吸收峰,通
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

多胺氧化酶(Polyamine oxidasePAO)试剂盒说明书

微量法100T/96S

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

多胺氧化酶是催化生物体内多胺氧化的关键酶,通过调节体内多胺水平和生成物的浓度,参与各种植物体对逆境胁迫的反应和生长发育过程。

测定原理:

PAO催化多胺氧化产生过氧化氢,在过氧化物酶存在的条件下与底物显色,在550nm下有特征吸收峰,通过测定吸光值增加速率来反映PAO活性

组成:

产品名称

AO031-100T/96S

Storage

试剂一:液体

120ml

4℃

试剂液体

3ml

4℃

试剂液体

1.5ml

4℃

试剂液体

1.5ml

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

酶标仪、台式离心机、可调式移液器、96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

粗酶液提取:

组织:按照组织质量(g):试剂一体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml试剂一)进行冰浴匀浆,然后10000g4℃离心20min,取上清,置冰上待测。

细菌、真菌:按照细胞数量(104个):试剂一体积(ml)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1ml试剂一),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g4℃,离心10min,取上清置于冰上待测。

血清等液体:直接测定。

测定步骤:

1、酶标仪预热30min以上,调节波长至550nm

2、样本测定

试剂名称(μl

测定管

试剂一

140

试剂二

20

试剂三

10

样本

20

试剂四

10

迅速混匀,于550nm下测定初始吸光值A130min后吸光值A2ΔA=A2-A1

PAO活性计算:

1)按样本蛋白浓度计算:

单位定义:每mg组织蛋白在每ml反应体系中每分钟A550变化0.001为一个酶活力单位。

PAOU/mg protΔA×V反总÷V×Cpr÷0.001÷T =333.33×ΔA÷Cpr

2)按样本鲜重计算:

单位定义:每g组织在每ml反应体系中每分钟A550变化0.001为一个酶活力单位。

PAOU/g 鲜重)ΔA×V反总÷(W× V÷V样总)÷0.001÷T =333.33×ΔA÷W

3)按细菌或细胞密度计算:

单位定义:每1万个细菌或细胞在每ml反应体系中每分钟A550变化0.001为一个酶活力单位。

PAOU/104cellΔA×V反总÷(500×V÷V样总)÷0.001÷T =0.667×ΔA

(4)按液体体积计算

单位的定义:每ml液体样本在每ml反应体系中每分钟A550变化0.001为一个酶活力单位。

PAOU/ml=ΔA×V反总÷V÷0.001÷T =333.33×ΔA

V反总:反应体系总体积,0.2mlV样:加入样本体积,0.02 mlV样总:加入提取液体积,1 mlT:反应时间,30 minCpr:样本蛋白质浓度,mg/mlW:样本质量,g500:细菌或细胞总数,500万。

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