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伊势久生物 肌酸激酶 Creatine Kinase CK 测定试剂盒 分光光度法50T/48S 微量法100T/96S

价格 900/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂肌酸激酶 Creatine Kinase, CK 测定试剂盒 分光光度法50T/
名称 生化试剂肌酸激酶 Creatine Kinase, CK 测定试剂盒 分光光度法50T/ 货号 AE013
包装类型 测定原理 6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

肌酸激酶(Creatine Kinase, CK)测定试剂盒说明书

分光光度法50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

CK(EC 2.7.3.2)主要存在于心脏、肌肉以及脑等组织中,能可逆地催化肌酸与ATP之间的转磷酰基反应,在能量运转、肌肉收缩和ATP再生中有重要作用,是临床诊断心脑疾病的一个重要指标。

测定原理:

CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP 生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。

组成:

产品名称

AE013-50T/48S

Storage

提取液:

60ml

4℃

试剂一:粉剂

1

4℃避光

试剂二:液体

15ml

4℃

说明书

一份

试剂一:粉剂1瓶,4℃避光保存,使用前加15ml蒸馏水溶解。

工作液:临用前根据用量将试剂一和试剂二以1:1混合。使用前37℃温育2min

自备仪器和用品:

天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计、1 ml石英比色皿和蒸馏水。

粗酶液提取

1.组织样本:按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液)进行冰浴匀浆,然后10000g4℃离心15min,取上清,置冰上待测。

2.血清样本:直接测定。

测定步骤:

1. 紫外分光光度计预热30min,调节波长至340nm,蒸馏水调零。

21 ml石英比色皿中加入200μl样本和300μl蒸馏水,最后加入500μl工作液,立即混匀,37℃下测定初始吸光值A11min后的吸光值A2ΔAA2-A1

CK活性计算公式

1、按组织蛋白含量计算

酶活定义:37℃pH7.0时,每毫克蛋白质1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK活性(nmol/min / mg prot=×V反总÷(V×Cpr)= 804×△A÷Cpr

2、按组织样本质量计算:

酶活定义:37℃pH7.0时,每克样品1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK活性(nmol/min /g 鲜重)=×V反总÷(V÷V样总×W)= 804×△A÷W

3. 按血清计算:

酶活定义:37℃pH7.0时,每升血清1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK活性(nmol/min /L=×V反总÷V= 804×△A

NADPH摩尔消光系数,6220L /mol/cmd:比色皿光径,1cmV反总:反应体系总体积,1mlV样:反应体系中样本体积,0.2mlT,反应时间,1minCpr:样本蛋白浓度,mg/mlW:样本质量,g

注意事项

1. 配制好的工作液4℃稳定7天,请配制后尽快使用。

2. 血清的CK不稳定,采集样本后尽快测定,4℃避光保存可稳定24h

3. 样品蛋白质含量需要另外测定,可选用BCA蛋白含量测定试剂盒进行测定。

4. OD值大于0.5可用提取液适当稀释样品,并在计算公式中相应的改变稀释倍数。

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