伊势久生物 β-1 3葡聚糖酶 β-1 3-GA 检测试剂盒 分光光度法50T/24S 微量法100T/48S 科研专用
价格 | ¥580/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海舟福科贸有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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基本参数
纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂β-1 3葡聚糖酶 β-1 3-GA 检测试剂盒 分光光度法50T/24S |
名称 | 生化试剂β-1 3葡聚糖酶 β-1 3-GA 检测试剂盒 分光光度法50T/24S | 货号 | GMS024 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率来计 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
β-1,3葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,β-1,3-GA)试剂盒说明书
分光光度法50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
β-1,3-GA(EC3.2.1.73)主要存在植物中,催化β-1,3-葡萄糖苷键水解。在植物染病或处于其他逆境条件下,可诱导细胞大量合成β-1,3-GA,因此β-1,3-GA活性测定广泛应用于植物病理和逆境生理研究。
测定原理:
β-1,3-GA水解昆布多糖,内切β-1,3-葡萄糖苷键,产生还原末端,通过测定还原糖生成速率来计算其酶活性。
组成:
产品名称 |
GMS024-50T/24S |
Storage |
提取液:液体 |
50ml |
4℃ |
试剂一:粉剂 |
1瓶 |
4℃ |
试剂二:液体 |
30ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入3ml蒸馏水,充分溶解待用;用不完的试剂4℃保存;
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取:
1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1ml提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
3、血清(浆)样品:直接检测。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至550nm,蒸馏水调零。
2、样本测定(在1.5mlEP管中依次加入下列试剂):
试剂名称(μl) |
测定管 |
对照管 |
样本 |
100 |
100 |
蒸馏水 |
100 |
|
试剂一 |
100 |
充分混匀,放入37℃水浴60 min
试剂二 |
600 |
600 |
充分混匀,95℃水浴5min(盖紧,防止水分散失),流水冷却,550nm处记录各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式乘以相应稀释倍数),ΔA=A测定-A对照。每个测定管需设一个对照管。
β-1,3-GA活性计算:
1、标准条件下测定回归方程为y = 0.0958x -0.0192;x为标准品浓度(mg/ml),y为吸光值。
2、血清(浆)β-1,3-GA活力的计算
β-1,3-GA(mg/h/ml)=[(ΔA 0.0192)÷0.0958×V1]÷V1=10.438×(ΔA 0.0192)
3、细胞、细菌和组织中β-1,3-GA活力的计算
(1)按蛋白浓度计算
单位的定义:每mg组织蛋白每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h/mg prot)=[(ΔA 0.0192)÷0.0958×V1]÷(V1×Cpr)=10.438×(ΔA 0.0192) ÷Cpr
(2) 按样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h /g 鲜重)=[(ΔA 0.0192)÷0.09585×V1]÷(W×V1÷V2)=10.438×(ΔA 0.0192) ÷W
(3) 按细菌或细胞密度计算
单位的定义:每1万个细菌或细胞每小时产生1mg还原糖定义为一个酶活性单位。
β-1,3-GA(mg/h/104cell)=[(ΔA 0.0192)÷0.0958×V1]÷(500×V1÷V2)=0.0208×(ΔA 0.0192)
V1:加入反应体系中样本体积,0.1ml;V2:加入提取液体积,1ml;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本鲜重,g;500:细菌或细胞总数,500万。
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卢经理
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太阳山路188弄2号101
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