上海舟福科贸有限公司

主营产品：实验试剂,

ꉃꡇ솖솖퉨솖됈ꡇ

当前位置：首页 > 产品大全 > 化学试剂 > 生化试剂 > 伊势久生物线粒体苹果酸脱氢酶 MDHm 检测试剂盒分光光度50T/48S 微量法 100T/96S 科研专用

伊势久生物线粒体苹果酸脱氢酶 MDHm 检测试剂盒分光光度50T/48S 微量法 100T/96S 科研专用

价格	￥380/盒
起订量	≥1
所在地	上海上海	可售量 10000盒

联系人：卢经理

微信已验证

企业已验证

ꉃꡇ솖솖퉨솖됈ꡇ

手机扫码快速拨号

速购通标准会员第3年

上海舟福科贸有限公司

联系人：卢经理 QQ交谈 (联系时,请说明是在全球塑胶网上看到的)

联系电话：

手机号码：ꉃꡇ솖솖퉨솖됈ꡇ

公司官网： http://vpj32xer1.51pla.com

所在地区：上海上海市

主营产品：实验试剂,

扫一扫，加我微信

进入店铺

产品分类

最新产品

商品详情联系方式

进入手机版

基本参数

纯度	/	规格	50T/48S
品牌	伊势久	产品名称	生化试剂线粒体苹果酸脱氢酶 MDHm 检测试剂盒分光光度50T/48S
名称	生化试剂线粒体苹果酸脱氢酶 MDHm 检测试剂盒分光光度50T/48S	货号	KC014
包装类型	盒	测定原理	MDHm催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降
用途范围	生化研究	类别	生化试剂盒

线粒体苹果酸脱氢酶（MDHm）试剂盒说明书

分光光度法 50管/48样

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

MDH（EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中MDH是TCA循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中MDH催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物，连接多条重要的代谢途径。因此，MDH在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH分为NAD-依赖的MDH和NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH分布于细胞质和线粒体中。

测定原理：

催化NADH还原草酰乙酸生成苹果酸，导致340nm处光吸收下降。

组成：

产品名称	KC014-50T/48S	Storage
试剂一：液体	50ml	-20℃
试剂二：液体	10ml	-20℃
试剂三：液体	1ml	-20℃
试剂四：液体	50ml	4℃
试剂五：粉剂	2支	-20℃
试剂六：粉剂	2支	-20℃
说明书	一份

试剂五、粉剂×2支，-20℃保存；临用前加入300μl蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

试剂六、粉剂×2支，-20℃保存；临用前加入300μl蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。

自备仪器和用品：

紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1 ml石英比色皿和蒸馏水。

样本测定的准备：

组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：

①称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1ml试剂一和10μl 试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

②将匀浆液于600g，4℃离心5min。

③弃沉淀，将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。

④上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的MDH（此步可选做）。

⑤在步骤④中的沉淀中加入200μl试剂二和2μl 试剂三，超声波破碎（冰浴，功率20％或200W，超声3秒，间隔10秒，重复30次），用于线粒体MDH测定。

测定步骤：

1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2、将试剂四在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴10min以上。

3、操作表：

试剂名称（μl）	测定孔
样本	20
试剂四	760
试剂五	10
试剂六	10

将上述试剂按顺序加入1 ml石英比色皿中，混匀后立即在340 nm波长下记录初始吸光度A1和反应1min后的吸光度A2，计算ΔA=A1-A2。

计算公式中乘以相应稀释倍数。

MDHm活力单位的计算：

（1）按样本蛋白浓度计算：

单位的定义：每mg组织蛋白每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

MDHm（nmol/min/mg prot）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×10⁹]÷(V样×Cpr) ÷T=6430×ΔA÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：

单位的定义：每g组织每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

MDHm（nmol/min/g 鲜重）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×10⁹]÷（W× V样÷V样总）÷T =1299×ΔA÷W

（3）按细菌或细胞密度计算：

单位的定义：每1万个细菌或细胞每分钟消耗1 nmol的NADH定义为一个酶活力单位。

MDHm（nmol/min/10⁴cell）=[ΔA×V反总÷（ε×d）×10⁹]÷（2000×V样÷V样总）÷T=0.65×ΔA

V反总：反应体系总体积，8×10^-4L；ε：NADH摩尔消光系数，6.22×10³L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.02ml；V样总：加入提取液体积，0.202 ml；T：反应时间，1 min；W：样本质量，g；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；2000：细胞或细菌总数，2000万。