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伊势久生物 线粒体分离和提取检测试剂盒 分光光度法50T/48S 科研专用

价格 285/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂线粒体分离和提取检测试剂盒 分光光度法50T/48S
名称 生化试剂线粒体分离和提取检测试剂盒 分光光度法50T/48S 货号 OP022
包装类型 测定原理 利用专门试剂,配合超声波破碎线粒体,可以得到保持活性的线粒体酶
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

线粒体分离和线粒体酶提取试剂盒说明书

分光光度法 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

线粒体是半自主性细胞器,不仅是细胞内氧化磷酸化和合成三磷酸腺苷ATP)的主要场所,为细胞的活动提供能量,而且在许多生命活动中具有重要调控作用。因此,准确和全面分离保持正常活性的线粒体已经成为许多研究的前提。

测定原理:

利用专门试剂温和匀浆组织和细胞,再采用差速离心法从匀浆中分离完整线粒体;利用专门试剂,配合超声波破碎线粒体,可以得到保持活性的线粒体酶。

试剂的组成和配制:

产品名称

OP022-50T/48S

Storage

试剂一:液体

50ml

-20

试剂二:液体

10ml

-20

试剂三:液体

10ml

-20

试剂:液体

1ml

-20

说明书

一份

需自备的仪器和用品:

超声波破碎仪、台式离心机、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。

提取步骤:

1、准确称取约0.1g组织或收集约500万细胞,加入1mL试剂一和10uL 试剂四,用冰浴匀浆器或研钵研磨。

24 ℃ 600 g离心5min

3、弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,4 ℃ 11000 g离心10min

4、上清液即胞浆提取物,可用于研究线粒体蛋白向胞浆的释放。

5、沉淀为完整线粒体。含有完整的内膜和外膜,并具有线粒体的生理功能。可用于线粒体的生理功能等方面的研究。

6、在沉淀中加入200uL试剂二和2uL 试剂四,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),可用于线粒体酶活性测定。

7、在沉淀中加入200uL试剂三和2uL 试剂四,超声波破碎(冰浴,功率20%或200W,超声3秒,间隔10秒,重复30次),可用于线粒体蛋白浓度测定。

注意事项

1、 分离线粒体和提取线粒体蛋白质的所有步骤均需在冰上或4℃进行,所用溶液需冰浴或4℃预冷。

2、 通常在分离线粒体时前后两次离心速度选取600g11,000g,如果希望纯度更高,但对线粒体的得率要求不高,前后两次离心速度可以采用1000g3500g

3、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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