伊势久生物 结合态淀粉合成酶GBSS检测试剂盒 分光光度25T/24S 分光光度 50T/48S 微量法100T/96S
价格 | ¥2300/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品: 实验试剂,
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基本参数
纯度 | / | 规格 | 25T/24S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂结合态淀粉合成酶GBSS检测试剂盒 分光光度25T/24S |
名称 | 生化试剂结合态淀粉合成酶GBSS检测试剂盒 | 货号 | SA003 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
结合态淀粉合成酶(Granule-bound starch synthase,GBSS)
试剂盒说明书
分光光度法
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
GBSS(EC 2.4.1.21)以束缚态存在于淀粉体中,催化淀粉链的加长反应,主要负责直链淀粉的合成。
测定原理:
GBSS催化ADPG与淀粉引物(葡聚糖)反应,将葡萄糖分子转移到淀粉引物上,同时生成ADP;进一步通过反应体系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化NADP 还原为NADPH,其中NADPH生成量与前一步反应生成的ADP数量呈正比,通过340nm下测定NADPH的增加量,可以计算GBSS活性。
组成:
产品名称 |
SA003-25T/24S |
SA003-50T/48S |
Storage |
提取液:液体 |
60ml×2 |
60ml×2 |
4℃ |
试剂一:液体 |
25ml |
50ml |
4℃ |
试剂二:粉剂 |
1瓶 |
1瓶 |
4℃ |
试剂三:粉剂 |
1瓶 |
1瓶 |
4℃ |
试剂四:粉剂 |
1瓶 |
1瓶 |
4℃ |
试剂五:液体 |
1瓶 |
1瓶 |
-20℃ |
试剂六:粉剂 |
1瓶 |
1瓶 |
-20℃ |
说明书 |
1份 |
SA003-25T/24S试剂二临用前加入7ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-25T/24S试剂三临用前加入4ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-25T/24S试剂四临用前加入9ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-25T/24S试剂五临用前加入0.5ml蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-25T/24S试剂六临用前加入0.5ml蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-50T/48S试剂二临用前加入14ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-50T/48S试剂三临用前加入8ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-50T/48S试剂四临用前加入17ml试剂一充分混匀备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-50T/48S试剂五临用前加入1ml蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
SA003-50T/48S试剂六临用前加入1ml蒸馏水,充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融;
自备仪器和用品:
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、移液器、1 ml石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液制备:
称取0.1~0.2g组织(建议称取约0.1g组织),加入1ml提取液,冰浴中匀浆。10000g ,4℃离心10min,弃上清,在沉淀中加入1ml提取液充分混匀,置冰上待测。
测定步骤:
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
2、在EP管中按顺序加入下列试剂
试剂名称(μl) |
测定管 |
样本 |
150 |
试剂二 |
270 |
混匀,30℃保温20 min,置沸水浴中1 min(盖紧,防止水分散失),冰浴冷却
试剂三 |
150 |
混匀,30℃保温30 min,置沸水浴中1 min(盖紧,防止水分散失),冰浴冷却,10000g 4℃离心10min,取上清液(如果一次性测定样本较多,可将试剂四、五和六按比例配成混合液)
上清液 |
450 |
试剂四 |
300 |
试剂五 |
15 |
试剂六 |
15 |
混匀后立即340 nm波长下记录初始吸光度A1和 2min后的吸光度A2,计算ΔA=A2-A1。
注意:试剂二如有沉淀,加入之前要使之充分溶解混匀。
GBSS活性计算:
1、按样本蛋白浓度计算:
单位的定义:每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GBSS(nmol/min /mg prot)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(Cpr×V样) ÷T×稀释倍数
=529×ΔA÷Cpr
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。
2、按照样本鲜重计算
单位的定义:每g组织每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。
GBSS活性(nmol/min /g 鲜重)=[ΔA×V反总÷(ε×d)×109]÷(V样÷V样总×W)÷T×稀释倍数
=529×ΔA÷W
V 反总:反应体系总体积,7.8×10-4L;ε:NADPH摩尔消光系数,6.22×103 L / mol /cm;d:比色皿光径,1cm;V样:加入样本体积,0.15 ml;V样总:加入提取液体积,1 ml;T:反应时间,2 min;稀释倍数:1.9;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本质量。
上海舟福科贸有限公司
联系人:
卢经理
服务热线:
넉쒇ꄲ흉퍧퍧넉퍧횅흉
公司地址:
太阳山路188弄2号101
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