伊势久生物 可溶性酸性转化酶 S-AI 检测试剂盒说明书 分光光度法 50T/24S 微量法 100T/48S 科研专用
价格 | ¥550/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海舟福科贸有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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基本参数
纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂可溶性酸性转化酶 S-AI 检测试剂盒说明书 分光光度法 50T/24S |
名称 | 生化试剂可溶性酸性转化酶 S-AI 检测试剂盒说明书 分光光度法 50T/24S | 货号 | SC011 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | S-AI催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝 基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
可溶性酸性转化酶(Soluble acid invertase, S-AI)试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
蔗糖转化酶(Invertase,Ivr)催化蔗糖不可逆地分解为果糖和葡萄糖,是高等植物蔗糖代谢关键酶之一。根据最适 pH,Ivr分为酸性转化酶(AI)和中性转化酶(NI)两种类型。
AI的最适pH为3~5。AI分为可溶性AI(S-AI)和细胞壁不溶性AI(B-AI)两种类型。S-AI主要存在于细胞液泡或自由空间中,最适 pH 为4.5~5.0(酸性),通过降解液泡中蔗糖,调节液泡中蔗糖的利用和果实内糖类的积累。
测定原理:
S-AI催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在510nm有特征光吸收,在一定范围内510nm光吸收增加速率与S-AI活性成正比。
组成:
产品名称 |
SC011-50T/24S |
Storage |
提取液:液体 |
50ml |
4℃ |
试剂一:液体 |
50ml |
4℃ |
试剂二:粉剂 |
1瓶 |
4℃ |
试剂三:液体 |
30ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存;临用前加入25ml试剂一充分溶解备用;用不完的试剂4℃保存;
自备仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取提取:
按照组织质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。12000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
测定步骤和加样表:
试剂名称(μl) |
测定管 |
对照管 |
样本 |
200 |
200 |
试剂一 |
800 |
|
试剂二 |
800 |
混匀, 37℃准确水浴30min后,95℃水浴10min(盖紧,以防水分散失),流水冷却后充分混匀(以保证浓度不变)
试剂三 |
500 |
500 |
混匀,95℃水浴10min(盖紧,以防止水分散失),流水冷却后充分混匀, 510nm处,蒸馏水调零,记录各管吸光值A,如果吸光值大于2,可以用蒸馏水稀释后测定(计算公式中乘以相应稀释倍数),ΔA=A测定-A对照
S-AI活性计算:
标准条件下测定的回归方程为y = 0.0016x -0.001;x为标准品浓度(μg/ml),y为吸光值。
(1)按蛋白浓度计算:
单位的定义:37℃每mg蛋白每分钟产生1μg还原糖定义为一个酶活性单位。
S-AI活性(μg/min/mg prot)=[(ΔA 0.001) ÷0.0016×V1]÷(V1×Cpr ) ÷T=20.8×(ΔA 0.001) ÷Cpr
(2)按鲜重计算:
单位的定义:37℃每g组织每分钟产生1μg还原糖定义为一个酶活性单位。
S-AI活性(μg/min/g鲜重)=[(ΔA 0.001) ÷0.0016×V1]÷(W ×V1÷V2) ÷T=20.8×(ΔA 0.001) ÷W
V1:加入反应体系中样本体积,0.2ml;V2:加入提取液体积,1ml;T:反应时间,30min; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml;W:样本鲜重,g。
上海舟福科贸有限公司
联系人:
卢经理
服务热线:
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太阳山路188弄2号101
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