伊势久生物 亚铁氧化酶 HP 检测试剂盒 分光法 50T/24S 微量法 100T/48S 科研专用
| 价格 | ￥850/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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主营产品： 实验试剂,
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基本参数
| 纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
| 品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂亚铁氧化酶 HP 检测试剂盒 分光法 50T/24S |
| 名称 | 生化试剂亚铁氧化酶 HP 检测试剂盒 分光法 50T/24S | 货号 | OT016 |
| 包装类型 | 盒 | 测定原理 | 通过测定Fe2+的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性 |
| 用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
亚铁氧化酶（Hephaestin,HP）试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
Hephaestin (HP)作为铜蓝蛋白的同系物,是近年来发现的铁转运蛋白亚铁氧化酶，HP属亚铁氧化酶家族成员,具有亚铁氧化酶的活性,参与体内铁代谢。HP的表达可受铁、铜及锌等金属离子的调节。HP催化Fe2 氧化生成Fe3 ，在介导铁的跨膜转运中有重要作用。
测定原理：
HP催化Fe2 氧化为Fe3 ，Fe2 和ferrozine反应显色，在560 nm下有特征吸光值。通过测定Fe2 的减少速率可测得亚铁氧化酶的活性。
试剂组成和配制：
产品名称 |
OT016-50T/24S |
Storage |
试剂一：液体 |
50ml |
4℃ |
试剂二：粉剂 |
3ml |
4℃ |
试剂三：粉剂 |
30ml |
4℃避光 |
说明书 |
一份 |
|
需自备仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
粗酶液提取：
按照组织质量（g）：水ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1ml蒸馏水），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至560 nm，蒸馏水调零。
2、在玻璃比色皿中加入下列试剂：
试剂名称（μl） |
测定管 |
对照管 |
试剂一 |
250 |
250 |
试剂二 |
50 |
50 |
样本 |
50 |
50 |
蒸馏水 |
150 |
150 |
试剂三 |
混匀，40℃静置30 min |
500 |
试剂三 |
500 |
混匀，立即测定A对照和A测定，ΔA=A对照-A测定。(每个测定管需设一个对照管)：
HP活性计算:
标准曲线：y = 16.427x - 0.0006，R2= 0.9998；(x为标准品浓度，μmol/ml；y为吸光值ΔA)
（1）按样本质量计算
单位定义：每g样本每分钟氧化1nmol Fe2 定义为一个酶活力单位。
HP（nmol/min/g 鲜重）=（△A 0.0006）÷ 16.427×V总÷T ÷(W× V样÷V样总)× 1000= 20.29×（△A 0.0006）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
单位定义：每mg蛋白每分钟氧化1nmol Fe2 定义为一个酶活力单位。
HP（nmol/min/mg prot）=（△A 0.0006）÷ 16.427×V总÷T ÷（Cpr×V样）× 1000= 20.29×（△A 0.0006）÷Cpr
V总：反应体系体积，0.1 ml；V样：加入样本体积0.01 ml；V样总：加入提取液体积，1 ml；T：反应时间，30min；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/ml；1000，μmol到nmol的转换系数。
上海舟福科贸有限公司
联系人：
卢经理
服务热线：
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公司地址：
太阳山路188弄2号101
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