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伊势久生物 脂氧合酶 LOX 检测试剂盒 分光光度法50T/24S 微量法100T/48S 科研专用

价格 620/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/24S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂脂氧合酶 LOX 检测试剂盒 分光光度法50T/24S
名称 生化试剂脂氧合酶 LOX 检测试剂盒 分光光度法50T/24S 货号 FA015
包装类型 测定原理 测定280nm吸光度增加速率,来计算LOX活性
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒


脂氧合酶(Lipoxygenase, LOX)活性测定试剂盒说明书

分光光度法 50/24

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

LOX广泛存在于动植物组织中,催化不饱和脂肪酸氧化反应,导致膜脂过氧化。在生物体的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。

测定原理:

LOX催化亚油酸氧化,氧化产物在280nm处有特征吸收峰;测定280nm吸光度增加速率,来计算LOX活性。

组成:

产品名称

FA015-50T/24S

Storage

试剂一:液体

50ml

4℃

试剂二:液体

50ml

4℃

试剂三:粉剂

1

4℃

说明书

一份

自备仪器和用品:

研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。

粗酶液提取:

按照组织质量(g):试剂一体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml试剂一)进行冰浴匀浆。16000g4℃离心20min,取上清置冰上待测。

测定:

1. 分光光度计预热30 min,调节波长到280nm,蒸馏水调零。

2. 在试剂三中加入25ml试剂二(振荡混匀1min),在30℃水浴中预热10 min以上。用不完的试剂4℃保存。

3. 对照管:依次在1ml石英比色皿中加入100μl样本和900μl试剂二,30℃反应30min后,记录A对照。

4. 测定管:依次在1ml石英比色皿中加入100μl样本和900μl试剂三,30℃反应30min后,记录A测定。

5. ΔA=A测定-A对照

LOX活性计算公式:

1)按照蛋白浓度计算

活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.01个单位为1个酶活单位。

LOX (U/mg prot) =ΔA×V反总÷(Cpr×V)÷T×100

= 33.33×ΔA÷Cpr

2)按照样本质量计算

活性单位定义:25℃中每克组织每分钟催化吸光值变化0.01个单位为1个酶活单位。

LOX (U/g 鲜重) =ΔA×V反总÷(W×V÷V样总)÷T×100

= 33.33×ΔA÷W

Cpr:上清液蛋白浓度,mg/ml,需另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒;V样:加入反应体系中上清液体积,100μl=0.1mlV反总:反应总体积,1mlV样总:上清液总体积,1mlW:样本质量,gT:反应时间,30min

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