伊势久生物 脂氧合酶 LOX 检测试剂盒 分光光度法50T/24S 微量法100T/48S 科研专用
价格 | ¥620/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海舟福科贸有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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基本参数
纯度 | / | 规格 | 50T/24S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂脂氧合酶 LOX 检测试剂盒 分光光度法50T/24S |
名称 | 生化试剂脂氧合酶 LOX 检测试剂盒 分光光度法50T/24S | 货号 | FA015 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | 测定280nm吸光度增加速率,来计算LOX活性 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
脂氧合酶(Lipoxygenase, LOX)活性测定试剂盒说明书
分光光度法 50管/24样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
LOX广泛存在于动植物组织中,催化不饱和脂肪酸氧化反应,导致膜脂过氧化。在生物体的生长发育、成熟衰老及逆境胁迫过程中具有重要作用。
测定原理:
LOX催化亚油酸氧化,氧化产物在280nm处有特征吸收峰;测定280nm吸光度增加速率,来计算LOX活性。
组成:
产品名称 |
FA015-50T/24S |
Storage |
试剂一:液体 |
50ml |
4℃ |
试剂二:液体 |
50ml |
4℃ |
试剂三:粉剂 |
1瓶 |
4℃ |
说明书 |
一份 |
自备仪器和用品:
研钵、冰、台式离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿、可调式移液枪和蒸馏水。
粗酶液提取:
按照组织质量(g):试剂一体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml试剂一)进行冰浴匀浆。16000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。
测定:
1. 分光光度计预热30 min,调节波长到280nm,蒸馏水调零。
2. 在试剂三中加入25ml试剂二(振荡混匀1min),在30℃水浴中预热10 min以上。用不完的试剂4℃保存。
3. 对照管:依次在1ml石英比色皿中加入100μl样本和900μl试剂二,30℃反应30min后,记录A对照。
4. 测定管:依次在1ml石英比色皿中加入100μl样本和900μl试剂三,30℃反应30min后,记录A测定。
5. ΔA=A测定-A对照
LOX活性计算公式:
(1)按照蛋白浓度计算
活性单位定义:25℃中每毫克蛋白每分钟催化吸光值变化0.01个单位为1个酶活单位。
LOX (U/mg prot) =ΔA×V反总÷(Cpr×V样)÷T×100
= 33.33×ΔA÷Cpr
(2)按照样本质量计算
活性单位定义:25℃中每克组织每分钟催化吸光值变化0.01个单位为1个酶活单位。
LOX (U/g 鲜重) =ΔA×V反总÷(W×V样÷V样总)÷T×100
= 33.33×ΔA÷W
Cpr:上清液蛋白浓度,mg/ml,需另外测定,建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒;V样:加入反应体系中上清液体积,100μl=0.1ml;V反总:反应总体积,1ml;V样总:上清液总体积,1ml;W:样本质量,g;T:反应时间,30min。
上海舟福科贸有限公司
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卢经理
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太阳山路188弄2号101
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