伊势久生物 磷脂酶C PLC 检测试剂盒 分光光度法50T/48S 微量法100T/96S 科研专用
价格 | ¥4200/盒 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海舟福科贸有限公司
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主营产品: 实验试剂,
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基本参数
纯度 | / | 规格 | 50T/48S |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂磷脂酶C PLC 检测试剂盒 分光光度法50T/48S |
名称 | 生化试剂磷脂酶C PLC 检测试剂盒 分光光度法50T/48S | 货号 | FA027 |
包装类型 | 盒 | 测定原理 | 磷脂酶C催化水解NPPC产生对硝 基苯酚,在410nm处有特征吸收峰 |
用途范围 | 生化研究 | 类别 | 生化试剂盒 |
磷脂酶C(PhospholipasesC,PLC)试剂盒说明书
分光光度法 50管/48样
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
磷脂酶C(EC 3.1.4.3)是一种水解甘油磷酸酯C3位点甘油磷酸酯键的脂类水解酶,广泛存在于微生物及动植物的组织和细胞中,在细胞代谢、细胞传递、生长发育等方面具有重要作用。
测定原理:
磷脂酶C催化水解NPPC产生对硝基苯酚,在410nm处有特征吸收峰。
组成:
产品名称 |
FA027-50T/48S |
Storage |
提取液:液体 |
50ml |
4℃ |
试剂一:液体 |
55ml |
4℃ |
试剂二:液体 |
25ml |
4℃避光 |
试剂三:液体 |
20ml |
4℃ |
说明书 |
一份 |
自备仪器和用品:
天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计、1 ml玻璃比色皿、恒温水浴锅。
酶液提取:
1.组织:按照质量(g):提取液体积(ml)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g,加入1ml提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于4℃,10000g离心5min,取全部上清于4℃、100000g离心30min,弃上清,取沉淀溶于1ml试剂一。
2.细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1ml提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后于4℃,10000g离心5min,取全部上清于4℃、100000g离心30min,弃上清,取沉淀溶于1ml试剂一。
3.血清:直接测定。
测定操作:
空白管 |
测定管 |
|
样品(μl) |
100 |
|
试剂一(μl) |
100 |
|
试剂二(μl) |
500 |
500 |
充分混匀,37℃反应30min |
||
试剂三(μl) |
400 |
400 |
充分混匀,于1ml玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定410nm处吸光值,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管。 |
酶活计算公式:
标准曲线:y = 0.0191x - 0.0103,R2= 0.9991
1.按照蛋白浓度计算
酶活性定义:每毫克蛋白每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性(nmol/min/mg prot)=(△A 0.0103)÷ 0.0191×V反总÷(V样×Cpr) ÷T
= 17.45×(△A 0.0103)÷ Cpr
2.按照样本质量计算
酶活性定义:每克组织每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性(nmol/min/g 鲜重)=(△A 0.0103)÷ 0.0191×V反总÷(V样÷V样总×W) ÷T
= 17.45×(△A 0.0103)÷ W
3.按照细胞数量计算
酶活性定义:每104个细胞每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性(nmol/min/104cell)=(△A 0.0103)÷ 0.0191×V反总÷(V样÷V样总×细胞数量) ÷T
= 17.45×(△A 0.0103)÷ 细胞数量
4.按照液体体积计算
酶活性定义:每毫升血清每分钟水解NPPC产生1nmol对硝基苯酚所需的酶量为一个酶活力单位。
PLC活性(nmol/min/ml)= (△A 0.0103)÷ 0.0191×V反总÷V样÷T
= 17.45×(△A 0.0103)
V反总:反应总体积,1ml;V样:加入样本体积,0.1ml;V样总:加入提取液体积,1ml;Cpr:样本蛋白浓度,mg/ml;W:样本质量,g;T:反应时间,30min
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服务热线:
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