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伊势久生物 乙醇酸氧化酶 GO 检测试剂盒 分光光度法50T/48S 微量法 100T/96S 科研专用

价格 580/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂乙醇酸氧化酶 GO 检测试剂盒 分光光度法50T/48S
名称 生化试剂乙醇酸氧化酶 GO 检测试剂盒 分光光度法50T/48S 货号 PSS020
包装类型 测定原理 乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

乙醇酸氧化酶(glycollic oxidase, GO)试剂盒说明书

分光光度法 5048

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.15)是植物光呼吸代谢中的关键酶,也是光下合成草酸的关键酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,对研究光呼吸代谢过程及其调控具有重要意义。

测定原理:

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和盐酸苯肼反应生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。

组成:

产品名称

PSS020-50T/48S

Storage

提取液:液

50ml

4℃

试剂一:液体

35ml

4℃

试剂二:粉剂

1

4℃避光

试剂三:液体

5ml

4℃

说明书

一份

试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存,临用前加10ml双蒸水溶解;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。

自备仪器和用品:

天平、低温离心机、紫外分光光度计、1ml石英比色皿

酶液提取:

按照组织质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1ml提取液),进行冰浴匀浆。12000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。

测定步骤:

测定管

样本(μl

50

试剂一(μl

650

试剂二(μl

200

试剂三(μl

100

充分混匀,立即于1ml石英比色皿中测定324nm10s190s吸光值A1A2△A=A2-A1

酶活性计算公式

1.按照蛋白浓度计算

酶活性定义每毫克蛋白每分钟氧化1 nmol乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。

GO活性(nmol/min /mg prot= ×V反总÷V×Cpr÷T= 392×△A÷Cpr

2.按照样本质量计算

酶活性定义每克组织每分钟氧化1 nmol乙醇酸所需的酶量为一个酶活力单位。

GO活性(nmol/min /g 鲜重)= ×V反总÷V×W÷V样总)÷T= 392×△A÷W

ε:乙醛酸苯腙毫摩尔消光系数:17L/mmol/cmd:比色皿光径,1cmV反总:反应总体积,1mlV样:反应中样本体积,0.05mlV样总:加入提取液体积,1mlCpr:样本蛋白浓度,mg/mlW,样本质量,gT:反应时间,3min

注意事项

1.测定之前进行预实验,若吸光值较高,请将样品用提取液进行适当的稀释再测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。

2.色素含量较高的样品,可在提取酶时加活性炭吸附。

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