上海舟福科贸有限公司
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伊势久生物 维 生素B6 VB6 检测试剂盒 分光光度法50T/48S 微量法100T/96S 科研专用

价格 550/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 50T/48S
品牌 伊势久 产品名称 生化试剂维 生素B6 VB6 检测试剂盒 分光光度法50T/48S
名称 生化试剂维 生素B6 VB6 检测试剂盒 分光光度法50T/48S 货号 VS003
包装类型 测定原理 VB6与4-氨基安替比林在强氧化剂作用下生成稳定的黄色化合物,在390nm有特征吸收峰
用途范围 生化研究 类别 生化试剂盒

维生素B6Vitamin B6VB6)试剂盒说明书

分光光度法 50/48

正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

维生素B6Vitamin B6又称吡哆素,其包括吡哆醇、吡哆醛及吡哆胺,在体内以磷酸酯的形式存在,是一种水溶性维生素,在细胞中参与多种蛋白质和氨基酸的代谢,对生物体具有极其重要的作用。

测定原理:

VB64-氨基安替比林在强氧化剂作用下生成稳定的黄色化合物,在390nm有特征吸收峰。

组成:

产品名称

VS003-50T/48S

Storage

提取液:液体

35ml

4℃

试剂一:液体

1ml

4℃

试剂二:液体

12ml

4℃

试剂三:液体

18ml

4℃避光

试剂四:液体

18ml

4℃避光

说明书

一份

自备仪器和用品:

天平、研钵、离心机、可见分光光度计、恒温水浴锅、1 ml玻璃比色皿、蒸馏水。

样本处理:

1.组织:将样品磨碎,按照质量(g):提取液体积(ml)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入0.6ml提取液)加入提取液,60℃浸提30min,加蒸馏水0.4ml,混匀后于25℃16000rpm离心10min,取上清测定(动物组织等蛋白含量较高的样本建议离心20-30分钟)。

2.细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(ml)为500~10001的比例(建议500万细胞加入0.6ml提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);加蒸馏水0.4ml,混匀后于25℃16000rpm离心10min,取上清测定。

3.血清:直接测定。

测定操作:

空白管

测定管

样品(μl

200

试剂一(μl

200

试剂二(μl

200

200

试剂三(μl

300

300

试剂四(μl

300

300

充分混匀,25℃反应20min,于1ml玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定390nm处吸光值,记为A空白管和A测定管,A=A测定管-A空白管。空白管只要做一管。

计算公式:

标准曲线:y = 0.3635x 0.0205R2 = 0.9986

1. 按照蛋白含量计算

VB6含量(μg/mg prot=A - 0.0205÷ 0.3635×V反总÷V×Cpr

= 13.76×A - 0.0205÷ Cpr

2. 按照样本质量计算

VB6含量(μg/g=A - 0.0205÷ 0.36359 ×V反总÷V×W÷V样总)

= 13.76×A - 0.0205÷ W

3. 按照细胞数量计算

VB6含量(μg/104cell=A - 0.0205÷ 0.3635×V反总÷V×细胞数量÷V样总)

= 13.76×A - 0.0205÷ 细胞数量

4. 按照液体体积计算

VB6含量(μg/ml=A - 0.0205÷ 0.3635×V反总÷V

=13.76×A - 0.0205

V反总:反应总体积,1ml;:V样:加入样本体积,0.2mlV样总:加入提取液体积,1mlCpr:蛋白浓度,mg/mlW:样本质量,g

注意事项:

1.若测定结果中吸光值超过1,请将样本稀释后进行测定,并在计算公式中乘以稀释倍数。

2.蛋白浓度较高的样品,比如动物组织,若显色完成后有沉淀产生,将样本稀释后再测定,在计算公式中乘以稀释倍数。

3.显色完成后立即进行测定。

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