伊势久生物 快速内切酶NheI 30Rxns 科研专用
价格 | ¥240/袋 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000袋 |
产品推荐
-
¥22.5元
苏木色精(粉末)CAS 517-28-2 伊势久生物 D0038 1g 5g 10g 25g 100g 实验 科研专用
-
¥54元
斐林试剂(Fehling'ssolution) 伊势久生物 KB005 100ml×2 500ml×2 实验 科研专用
-
¥1500元
纤维素酶R-10日本Yakult养乐多进口 CAS号 9012-54-8 BE001 10g 科研专用伊势久
-
¥103元
伊势久生物 蛋白酶K溶液(Proteinase K,20mg/ml) 1ml 5ml 科研专用
-
¥675元
抗性淀粉检测试剂 盒(分光光度法50T/48S)伊势久生物 KB058 实验试剂 现配溶液 科研专用 厂家直销 量大优惠
上海舟福科贸有限公司
联 系 人:卢经理 QQ交谈 (联系时,请说明是在全球塑胶网上看到的)
联系电话:
手机号码:꤈덧씔꤈
公司官网: http://vpj32xer1.51pla.com
所在地区:上海 上海市
主营产品: 实验试剂,
扫一扫,加我微信
进入店铺-
尿素溶液(10mol/L) 伊势久生物 BO188 100ml 实验生物试剂 现配溶液 科研专用 厂家直销 量大优惠
¥41.85元
-
尿素溶液(9.5mol/L) 伊势久生物 BO187 100ml 实验生物试剂 现配溶液 科研专用 厂家直销 量大优惠
¥40.5元
-
尿素溶液(8mol/L) 伊势久生物 BO186 100ml 实验生物试剂 现配溶液高品质 科研专用 厂家直销 量大优惠
¥33.75元
-
TritonX-100溶液(0.5%)/曲拉通X-100溶液(0.5%)伊势久生物 BO179 100ml 实验科研专用
¥22.5元
-
葡萄糖-磷酸盐缓冲液(G-PBS) 伊势久生物 BO072 500ml 实验生物试剂 现配溶液高品质 科研专用 厂家直销
¥162元
基本参数
纯度 | / | 规格 | MD054-30Rxns |
品牌 | 伊势久 | 产品名称 | 生化试剂快速内切酶NheI |
名称 | 生化试剂快速内切酶NheI | 包装类型 | 袋 |
储存条件 | -20℃ | 用途范围 | 生化研究 |
保质期 | 2年 | 类别 | 分子生物系列 |
快速内切酶NheI
REF: MD054
5"...G C T A G C...3"
3"...C G A T C G...5"
同裂酶:AsuNHI
注:同裂酶对于不同的甲基化修饰也许具有不同敏感性。
建议反应条件
1× Reaction缓冲液;
37℃温育;
参照“DNA 快速酶切流程”配制反应体系。
失活条件:80℃ 温育 20 min。
产品组成
组分 / 规格 |
MD054-30Rxns |
Storage |
快速内切酶NheI |
30 μl |
-20℃ |
10× ReactionBuffer |
1 ml |
-20℃ |
10× ReactionColor Buffer |
1 ml |
-20℃ |
产品说明
快速内切酶是一系列经过基因工程重组、能够在 5~15 分钟内精确完成 DNA 切割的限制性内切酶,适用于质粒DNA、PCR 产物或基因组 DNA 等的快速酶切。快速内切酶 快速内切酶具有如下特点:5~15 分钟内即可完成酶切;共用一种酶切 Buffer,大大简化酶切反应体系;良好的酶活冗余度,轻松应对底物过量或困难模板酶切。此外,伊势久去磷酸化、连接试剂在 Reaction酶切 Buffer 中具有 100% 活性,支持一管化反应,提升“酶切—修饰—连接”的体验。
使用方法
1. DNA 快速酶切流程
①冰上按照下表配制反应体系:
质粒DNA |
PCR 产物 |
基因组DNA |
|
ddH2O |
15μl |
16μl |
30μl |
10× ReactionBuffer 或 10× ReactionColor Buffer |
2μl |
3 μl |
5μl |
底物 DNA |
2μl(up to 1 μg) |
10μl (~0.2 μg) |
10μl (5 μg) |
快速内切酶 NheI |
1μl |
1μl |
5μl |
Total |
20μl |
30μl |
50μl |
a. 本体系适用于经过纯化的PCR 产物酶切。未纯化的PCR 产物具备一定的离子强度,10× ReactionBuffer 加入量可适当减少至2μl。但由于DNA 聚合酶同时具有外切酶活性,会影响酶切产物,因此如下一步需进行克隆等操作,建议酶切前对PCR 产物进行纯化。
② 轻柔吸打或轻弹管壁以混匀(切勿涡旋),然后瞬时离心以收集挂壁液滴;
③ 37℃温育 15 min(质粒),或 15~30 min(PCR 产物),或 30~60 min(基因组 DNA);
④ 80℃温育 20 min 即可使酶失活,停止反应(可选)。
2. 双酶切或多酶切
① 每种快速内切酶的用量为 1 μl,并根据需要适当扩大反应体系;
② 所有快速内切酶的体积总和不得超过总反应体系的 1/10;
③ 如果所用的几种快速内切酶的最适反应温度不同,应先以最适温度低的酶开始酶切,再添加最适温度较高的酶,在其最适反应温度下进行酶切反应。
3. 适用于质粒的扩大反应体系
DNA |
1 μg |
2 μg |
3 μg |
4 μg |
5 μg |
快速内切酶 NheI |
1μl |
2μl |
3μl |
4μl |
5μl |
10× ReactionBuffer 或 10× ReactionColor Buffer |
2μl |
2μl |
3μl |
4μl |
5μl |
Total |
20μl |
20μl |
30μl |
40μl |
50μl |
注:如果总反应体系大于 20 μl,应适当增加温育时间,尽量使用水浴、金属浴或沙浴。
质量控制
质控项目 |
质控标准 |
功能活性检测 |
最适反应温度下,在 20 μl反应体系中,1 μl快速内切酶 NheI 能够在 15 min内完全消化 1 μgλDNA 。 |
星号活性测试 |
最适反应温度下,将1 μll快速内切酶 NheI 与1 μgλDNA 共同温育 3 h,未检测到其他核酸酶污染或星号活性引起的底物非特异性降解,延时酶切可能出现星号活性 |
酶切—连接—再酶切检测 |
最适反应温度下,使用 1 μl快速内切酶 NheI 消化底物,回收酶切产物。在 22 ℃下使用适量 Fast T4 DNA Ligase 可以将酶切产物重新连接。将连接产物再次回收后,使用相同的内切酶可以重新切开连接产物。 |
非特异性内切酶活性检测 |
最适反应温度下,使用 1μl快速内切酶NheI 与 1 μg超螺旋质粒 DNA 共同温育 4 h,使用琼脂糖凝胶电泳检测,质粒 DNA 仍然处于超螺旋状态。 |
蓝白斑检测 |
将含有单一lacZα 基因的载体以 1 μlNheI消化,重新连接后转化入大肠杆菌感受态细胞,涂布在含有对应抗生素、 IPTG 和 X-gal 的 LB 培养基平板上。连接正确的产物会生长出蓝色菌落,而连接错误(即 DNA 末端切口不完整)的产物将得到白色菌落。对于 Reaction系列限制酶而言,白色菌落比例应小于1%。 |
不同 DNA 中的酶切位点数量
λDNA |
ΦX174 |
pBR322 |
pUC57 |
pUC18/19 |
SV40 |
M13mp18/19 |
Adeno2 |
1 |
0 |
1 |
0 |
0 |
0 |
0 |
4 |
甲基化修饰影响
Dam |
Dcm |
CpG |
EcoKI |
EcoBI |
无影响 |
无影响 |
序列可能重叠 |
无影响 |
无影响 |
剪切受阻 |
在不同反应缓冲液中的活性
BIOISCO |
Thermo Scientific |
NEB |
Takara |
|
ReactionBuffer |
FastDigest Buffer |
CutSmart? Buffer |
QuickCut? Buffer |
|
活性 |
100% |
100% |
100% |
100% |
注:活性数据来自 BIOISCO 限制酶标准反应体系下的检测。
上海舟福科贸有限公司
联系人:
卢经理
服务热线:
꤈덧씔꤈
公司地址:
太阳山路188弄2号101
伊势久生物 快速内切酶NheI 30Rxns 科研专用相关产品
- 溶菌酶 CAS:9001-63-2 现货 100g/铝箔袋 厂价直销
- 【GIBCO】10270106南美胎牛血清 500ml
- 去氧胆酸钠 99%含量原料 100g起售 cas 302-95-4 厂家现货批发
- 美国MP BSA牛血清白蛋白1KG 标准级(BSA,GOLD)0218072801澳洲源
- MP BSA 牛血清白蛋白100G 标准级(分装)02180549910分
- 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 99% 原料 10g每瓶 cas 53-84-9 现货包邮
- 猪胆盐厂家包邮CAS:8008-63-7
- N,N-二甲基甘氨酸 99% 1118-68-9 原料厂家现货包邮
- L-天门冬酰胺厂家包邮CAS:70-47-3
- 鸿鑫瑞宇供应盐酸罗哌卡因132112-35-7原料价格
- 腺苷-3',5'-环状单磷酸钠水合物CAS号:37839-81-9鸿鑫瑞宇2019供应
- 溴芬酸钠CAS号:91713-91-6鸿鑫瑞宇现货供应
- 鸿鑫瑞宇供应溴乙酸甲酯除草剂,染料中间体
- 头孢西酮母核原料供应,鸿鑫瑞宇报价
- 双(2-氨基苯基)二硫中间体厂家,鸿鑫瑞宇报价
- 四羟基苯醌二钠盐鸿鑫瑞宇供应原料级
- 价格三环己基膦氟硼酸盐鸿鑫瑞宇供应
- 鸿鑫瑞宇卡非佐米API供应,原料厂家
猜你在找
- 蔗糖溶液(1mol/L) 伊势久生物 BO173 500ml 实验生物试剂 现配溶液高品质 科研专用 厂家直销 量大优惠
- SM007 草酸铵结晶紫染色液(0.1%)100ml 500ml 科研实验专用 现配试剂 伊势久
- 蔗糖溶液(2mol/L) 伊势久生物 BO174 500ml 实验生物试剂 现配溶液高品质 科研专用 厂家直销 量大优惠
- SM022瑞氏染色液(Wright stain)100mlх2 500mlх2科研实验专用 伊势久生物现配试剂
- 乙酸钠溶液(3mol/L,pH5.2) 伊势久生物 BO214 100ml 500ml 实验生物试剂 现配溶液 科研专用
- SM021 瑞氏-吉姆萨复合染色液(A+B)科研实验专用 100mlх2 250mlх2 优质供应 现配试剂 伊势久
- SM023 瑞氏染色液(Wright Stain,即用型) 伊势久现配试剂100ml 500ml 科研实验专用
- 乙酸钠溶液(3mol/L,pH5.2,无菌) 伊势久生物 BO215 100ml 500ml 实验生物现配试剂 科研专用
- D0046 甲基绿(认证) 1g 5g 10g 25g 100gcas:7114-03-6现货伊势久分装原装进口
- BO199 PBS-EDTA缓冲液(1×PE,pH8.0 500ml 生化研究科研实验专用 量大优惠 全国快递可寄伊势久
- CO011 PBS-EDTA缓冲液(4×PE,PH8.0)500ml 科研实验专用 各大院校 经销商 量大优惠 伊势久
- IH017 TBS缓冲液(0.02mol/L,PH8.2))500ml 科研实验专用 学校 经销商 量大优惠 伊势久
免责声明:以上展示的伊势久生物 快速内切酶NheI 30Rxns 科研专用信息由上海舟福科贸有限公司自行提供,内容的真实性、准确性和合法性由发布企业负责,
全球塑胶网对此不承担责任。
风险防范建议:为保障您的利益,建议优先选择速购通会员
手机版:伊势久生物 快速内切酶NheI 30Rxns 科研专用
更新产品链接为:https://www.51pla.com/html/sellinfo/489/48900083.htm
发送询价单