伊势久生物 DNA退火缓冲液(5×) 1ml 科研专用
价格 | ¥72.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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基本参数
纯度 | / | 规格 | 1ml |
品牌 | 伊势久 | 用途范围 | 生化研究 |
包装类型 | 瓶 | 保质期 | —20℃,12个月 |
产品规格 | 1ml | 产品名称 | DNA退火缓冲液(5×) |
产品用途 | 生化研究 | 名称 | DNA退火缓冲液(5×) |
主要用途 | 用于DNA oligo退火的缓冲液 |
DNA 退火缓冲液(5×)
简介:
DNA 寡核苷酸退火缓冲液(Annealing Buffer for DNA Oligos)简称为 DNA 退火缓冲液,是一种可用于 DNA oligo 退火的缓冲液,可用于常规的 DNA oligo 的退火,尤其适合于较难退火的用于 RNAi (也称 siRNA) 质粒构建的 DNA oligo的退火。
BIOISCO Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)能有效避免 DNA oligo 自身形成发夹结构,并且两条 oligo 退火后可以直接和经酶切、纯化的质粒连接,转化后可以得到大量的阳性克隆。该本试剂操作简单,只需把待退火的 DNA oligo 和 Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)按照一定比例混合后,置于 PCR 仪上进行程序降温,约90min 即可完成。
组成:
产品名称
|
MP055-1ml
|
Storage
|
试剂(A): Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)
|
1ml
|
-20℃
|
试剂(B): Nuclease-Free Water
|
5ml
|
RT
|
说明书
|
一份
|
保存条件:
-20℃保存,12个月有效。
操作步骤(仅供参考):
1、把待退火的 DNA oligo 用经灭菌的超纯水或 Nuclease-Free Water 配制成 50μM ,同时溶解 Annealing Buffer for DNA Oligos(5×),混匀备用。
2、按如下退火反应体系操作:
Nuclease-Free Water
|
40μl
|
Annealing Buffer for DNA Oligos(5×)
|
20μl
|
DNA oligo A(50 μM)
|
20μl
|
DNA oligo B(50 μM)
|
20μl
|
Tatal
|
100μl
|
按照上述顺序,依次加入并混匀,如果所用 PCR 仪没有加热盖,可加入 Mineral Oil防止液体挥发。
3、 按如下 PCR 仪的退火条件:
步骤
|
温度
|
时间
|
作用
|
1
|
95℃
|
2min
|
Oligo 充分变性
|
2
|
每 90s 下降 1℃,降至 25℃
|
约 90min
|
程序退火
|
3
|
4℃
|
长期保存
|
暂时存放
|
4、退火后可直接用于连接反应,也可以-20℃冻存备用。如果退火结束后打算进行酶切等其它反应,最好用纯化试剂盒进行纯化,或者确保退火产物在反应体系中体积不超过 5% ,以避免 Annealing Buffer 对后续的酶反应体系的干扰。
注意事项:
1、避免反复冻融,以免效率下降。
2、该试剂只适合于 DNA oligo 的退火,不适用于 RNA oligo 的退火。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
4、本产品仅由于科研,严禁他用。
上海舟福科贸有限公司
联系人:
卢经理
服务热线:
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公司地址:
太阳山路188弄2号101
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