伊势久生物 Triton-NH4OH细胞裂解液 100ml 科研专用
价格 | ¥150.00/瓶 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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主营产品: 实验试剂,
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基本参数
纯度 | / | 规格 | 100ml |
品牌 | 伊势久 | 用途范围 | 生化研究 |
包装类型 | 瓶 | 保质期 | 4℃,12个月 |
产品规格 | 100ml | 产品名称 | Triton-NH4OH细胞裂解液 |
产品用途 | 生化研究 | 名称 | Triton-NH4OH细胞裂解液 |
Triton-NH4OH细胞裂解液
简介:
在生物科研领域,经常需要去除红细胞,去除红细胞的方法有多种,如ACK LysisBuffer。Tris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer, BIOISCOTriton-NH4OH细胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过滤除菌,经过Triton-NH4OHLysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。
组成:
产品名称
|
PC015-100ml
|
Storage
|
Triton-NH4OH细胞裂解液
|
100ml
|
4℃
|
说明书
|
一份
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保存条件:
4℃保存,12个月有效。
自备材料:
1、胰蛋白酶
2、离心机
3、PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液
4、胎牛血清
操作步骤(仅供参考):
(一)组织细胞样本的常规操作
1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。
2.裂解:加入3~ 5倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer I 轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4°C条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心:4°C,离心5min,弃红色上清.如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、 生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4°C,离心2~ 3min ,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS。生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。
7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
(三)血液样本的常规操作
1、取新鲜抗凝血,离心5min,弃上清。
2、裂解: 加入6~10倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4°C条件下操作更佳,亦可在室温下操作。
3、离心:4℃,400 ~ 500g离心5min,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。
4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3一次。
5、洗涤:根据实验要求加入适量PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4°C , 离心2~3min ,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBS、HBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。
6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。
注意:对于微量或少量的血液样本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer 进行第2步操作,并在4°C或室温裂解4~15min。
注意事项:
1、制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。
2、后续试验如果是用于细胞培养, 操作过程中应注意无菌操作, 尽量在超净工作台内操作。
3、离心步骤尽量在4°C离心机上操作。
4、常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心 ,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。
5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。
6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
7、本产品仅由于科研,严禁他用。
上海舟福科贸有限公司
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