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伊势久生物 Triton-NH4OH细胞裂解液 100ml 科研专用

价格 150.00/瓶
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000瓶

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基本参数

纯度 / 规格 100ml
品牌 伊势久 用途范围 生化研究
包装类型 保质期 4℃,12个月
产品规格 100ml 产品名称 Triton-NH4OH细胞裂解液
产品用途 生化研究 名称 Triton-NH4OH细胞裂解液

Triton-NH4OH细胞裂解液

简介:

在生物科研领域,经常需要去除红细胞,去除红细胞的方法有多种,如ACK LysisBufferTris-氯化铵红细胞裂解液、Gey's Lysis Buffer, BIOISCOTriton-NH4OH细胞裂解液(Triton-NH4OH Lysis Buffer)经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。本裂解液经过滤除菌,经过Triton-NH4OHLysis Buffer处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白的提取及各种常规的分析和检测。

组成:

产品名称

PC015-100ml

Storage

Triton-NH4OH细胞裂解液

100ml

4℃

说明书

一份

保存条件

4℃保存,12个月有效。

自备材料:

1、胰蛋白酶

2、离心机

3PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液

4、胎牛血清

操作步骤(仅供参考)

()组织细胞样本的常规操作

1、制备细胞悬液:新鲜组织经过胰蛋白酶或胶原酶等消化处理,通过适当方法制备成细胞悬液,离心弃上清。

2.裂解:加入3~ 5倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer I 轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4°C条件下操作更佳,亦可在室温下操作。

3、离心:4°C,离心5min,弃红色上清.如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3各一次。

5、洗涤:根据实验要求加入适量PBSHBSS、 生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4°C,离心2~ 3min ,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBSHBSS生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。

6、如有必要,重复上述步骤5一次,共洗涤1~2次。

7、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

()血液样本的常规操作

1、取新鲜抗凝血,离心5min,弃上清。

2、裂解: 加入6~10倍细胞沉淀体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer,轻柔吹打混匀,裂解。本操作步骤在4°C条件下操作更佳,亦可在室温下操作。

3、离心:4400 ~ 500g离心5min,弃红色上清。如无低温离心机,本步骤亦可在室温下操作。

4、如果发现红细胞裂解不完全,可以重复上述步骤2和步骤3次。

5、洗涤:根据实验要求加入适量PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液,轻柔混匀重悬沉淀。4°C , 离心2~3min ,弃上清,该离心步骤亦可在室温下操作。所加入的PBSHBSS、生理盐水或无血清培养液的量一般应大于细胞沉淀体积的5倍以上。

6、根据实验需要用适当溶液重悬细胞沉淀,进行计数、培养等后续实验。

注意:对于微量或少量的血液样本,可以不用第1步操作,可直接加入10倍血液体积的Triton-NH4OH Lysis Buffer 进行第2步操作,并在4°C或室温裂解4~15min

注意事项:

1、制备细胞悬液时应根据实验需要,不一定要制备成单细胞悬液。

2、后续试验如果是用于细胞培养, 操作过程中应注意无菌操作, 尽量在超净工作台内操作。

3、离心步骤尽量在4°C离心机上操作。

4、常规步骤与快速步骤的区别在于:常规步骤多了一步洗涤过程的离心 ,可以节省洗涤液的用量,并且洗涤效果也更好,不需要大体积的离心管;快速步骤少了一次离心过程,洗涤效果略差一些,同时需要大体积的离心管。

5、离心洗涤后,通常极微量的红细胞不会影响后续的检测。

6、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴次性手套操作。

7、本产品仅由于科研,严禁他用。

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