环氧基磁珠 环氧基磁性微球1微米 Homo-Epoxy磁珠
价格 | ¥9999/支 | |
起订量 | ≥1 | |
所在地 | 江苏 苏州 | 可售量 10000支 |
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Homo-Epoxy磁珠提供永久结合和固定各种含胺基、巯基配体。 珠子表面上的高密度环氧酸基团(Epoxy)可用于配体如蛋白质、肽和核酸的共价偶联。 环氧基磁珠可用于共价偶联胺、巯基或含羟基的配体。含羟基、胺和巯基的配体的偶联分别在pH 11-13、pH 9和pH 7.5~8.5下反应。不溶于水的配体可在50%有机溶剂(二甲基甲酰胺)中偶联。 Homo-Epoxy包含短臂和长臂磁珠,都适用于蛋白质和多肽的偶联。。
二、产品特性
形态:超顺磁球形
储存:10 mg/mL ,去离子水中 2~8 °C保存,勿冻结。
环氧基磁珠 Homo-Epoxy有利于小配体与磁珠的结合,包括但不限于单糖、肽和二糖。 它也可用于偶联各种配体,如蛋白A、StrepTactin、枯草杆菌蛋白酶和免疫球蛋白。 如果配体负载量太低,可能会导致非特异性吸附过大;如果配体负载量过高,可能会造成空间位阻。因此,强烈建议优化每个单独应用的磁珠用量。推荐用量一般为0.04~0.4 mg多肽/ mg磁珠。 以下实验方案可相应放大和缩小。
A.缓冲液
注意:缓冲液的离子强度对于获得更高的偶联效率至关重要。 偶联缓冲液应具有最小的离子强度,并且不应含有任何氨基(例如Tris)、硫醇、羟基和酚。但洗涤或储存缓冲液可含有氨基、硫醇、羟基和酚基团。
3) 洗涤缓冲液(Wash buffer): PBS, pH 7.4.;
B.偶联方法
1. 将10mg磁珠转移至EP管中。
3. 重复步骤2三次。
4. 将适量的蛋白质或肽溶解在1ml偶联缓冲液中。
5. 将蛋白质溶液加入洗过的磁珠中,重悬磁珠并孵育。
6. 用1ml PBS缓冲液洗磁珠3次。
8. 用1ml PBS缓冲液洗磁珠4-6次。
C-1.配体用量优化
为了有效控制pH值,建议使用10 mM的最小缓冲液强度。 合适的缓冲液包括碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐;不要使用包含Tris、甘氨酸或其他亲核试剂等组成的缓冲液。 环氧基磁珠在pH 9?13下较易与配体偶联,偶联pH的选择通常受到配体在碱性缓冲液中稳定性的限制。环氧基团在较高pH下与配体反应更快,然而高的pH同样促进了环氧基团的竞争性水解反应。偶联含羟基的配体大约pH?13。
C-3.偶联温度和时间
偶联后残留在磁珠上的活性基团需被封闭以避免与感兴趣的蛋白质发生不希望的反应。 使用1M乙醇胺在pH 8-9进行封闭反应4h。封闭完成后需要使用偶联缓冲液彻底洗涤磁珠以除去过量配体。对通过离子相互作用被捕获在树脂上少量配体,建议交替使用酸性缓冲液(100mM乙酸盐,500mM NaCl,pH4.0)和碱性缓冲液(100mM磷酸盐,500mM NaCl,pH8.0)洗涤。
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苏州北科纳米科技有限公司
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