苏州凯发新材料科技有限公司
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  • 主营产品: MOF 黑磷 石墨炔 纳米酶 多层风琴状
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磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒 高纯度高收率用时短

价格 1280/盒
起订量 ≥1
所在地 江苏 苏州 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 99% 规格 1盒
品牌 苏州凯发新材料 产地 江苏
支持定制 用途 科研

磁珠法细菌基因组DNA提取试剂盒是苏州北科震泽生物科技有限公司最新研制的一种细菌基因组DNA提取试剂盒。本产品采用Lysis Buffer和Proteinase K裂解细菌细胞,释放出基因组DNA,在结合液的作用下磁珠选择性的吸附裂解液中的基因组DNA。通过洗涤液的清洗完全除去磁珠吸附的少量杂质。在Elution Buffer的作用下 Beads释放吸附的基因组DNA,即获得高质量的基因组DNA。从1ml的菌液中可以获得10~20 μg DNA,OD260/OD280比值一般为1.7~1.9,抽提的DNA可直接用于下游实验。适用于手工细菌基因组DNA的提取,可配合各类磁棒式核酸提取仪或自动化/半自动化工作站。

【特点】

l 操作简便:提取过程无需离心;

l 效果稳定:OD260/OD280稳定在1.7-2.0之间,获得细菌基因组DNA的纯度更高;


请将试剂盒中的 Beads、Proteinase K和RNase A置于2-8℃保存,其余试剂室温保存,有效期详见包装。

l 磁珠长期放置后会聚集成团,从而使磁珠表面积减小,降低样品回收得率,使用前一定要涡旋振荡彻底混匀磁珠(通常需涡旋振荡20秒)。

试剂盒组成


操作步骤

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分菌→

1)牙签挑取平板菌落(1 mm)或取过夜培养细菌1 ml(细胞数为108-109)加入1.5 ml离心管。9000 rpm离心1 min,弃上清。(可选步骤:对于革兰氏阳性菌,加入200 ul溶菌酶溶液重悬菌体,37 ℃水浴30~60 min。对细胞壁较厚的革兰氏阳性菌,如金黄色葡萄球菌,可补加溶葡球菌酶助破壁。离心后备用。

裂解→

2)加入200 ulLysis buffer摇匀,漩涡振荡混匀,室温温育10分钟至溶液变粘稠;加入10 ul蛋白酶K,漩涡振荡器混匀,56 ℃消化30 min。(可选步骤:若革兰氏阳性菌溶液浑浊未消化完全,可12000 rpm离心2min后取上清使用

RNA

3)加入20 ulRNase A,漩涡振荡混匀,室温温育10分钟以除去RNA

除蛋白→

4)向离心管中加入180 ulBinding buffer,漩涡振荡1-2 s

结合→

5)400 ul试样加入磁珠悬液中(20 ulbead280 ul异丙醇在一个新离心管中先预混),静置5分钟后,于磁力架上磁分离20 s,去上清。

洗涤→

6)向离心管加入700 ulWash buffer,移液枪缓慢吹打混匀,磁力架上静置20 s,小心吸弃上清(重复该步骤2次)。倒置离心管2-3 min,室温晾干5 min,让残留乙醇挥发干净,以免影响后续实验。

洗脱→

7)向离心管加入50~100 ulElution buffer,缓慢吹打混匀1~2 min。(Elution buffer65~70 ℃中预热后洗脱效果更好,减小洗脱体积或多次洗脱可增大DNA浓度)离心管磁力架上静置0.5 min,小心吸走上清放入新离心管即为提取的DNA,存放于2-8 ℃,长期存放需置于-20 ℃

提示:本试剂盒仅限科研用途。

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